[发明专利]一种新的多肽——人半乳糖激酶11和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人半乳糖激酶11，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

半乳糖也是被细菌用作碳源的一个糖类。细胞代谢半乳糖，需要三种酶，即半乳糖激酶，半乳糖转移酶，半乳糖异构酶。在细胞内的代谢步骤如下：

半乳糖+ATP→半乳糖1-磷酸+ADP+H⁺

半乳糖1-磷酸+UDPGal→UDPGal+葡萄糖1-磷酸

UDPGal→UDPGlu

半乳糖激酶催化半乳糖代谢的第一步反应，即将半乳糖转换为1-磷酸半乳糖。原核生物和真核生物的半乳糖激酶序列都有三个非常保守的区域。其中最保守的区域是位于半乳糖激酶N末端的那个保守区域。该保守区域的特征序列是G-R-X-N-[LIV]-I-G-[DE]-H-X-D-Y。

酵母半乳糖激酶3蛋白(GAL3)是半乳糖系统快速反应所必须的。GAL3基因的表达是酵母半乳糖-蜜二糖调节单元GAL-4快速调节的半乳糖诱导反应所必须的。

酵母GAL1,GAL2,GAL7,GAL10和MEL1基因组成一个半乳糖诱导和半乳糖抑制基因家族，该基因家族编码的蛋白质在细胞利用半乳糖和蜜二糖时起作用[Johnston,M.1987.Microbiol.Rev.51:458-476]。在向生长在非发酵性碳源基质上的细胞中加入半乳糖，诱导的半乳糖调节基因转录子和蛋白水平在几分钟之内就提高[Torchia,T.E.,andJ.E.Hopper.1986.Genetics113:229-246][YargeR,J.,H.Halverson,andJ.E.Hopper.1984.Mol.Cell.Biochem.61:173-182]。调节该诱导活动的蛋白基因至少包括3个：GAL4,GAL80和GAL3[Oshima,Y.1982.Regulatory circuits for geneexpression159-180]。

GAL3调节基因的功能是半乳糖系统快速诱导所必须的，同时也是维护细胞在忍受非功能ga11,ga117，或ga110酶时的诱导状态[Nogi,Y.1986.J.Bacteriol.165:101-106]。GAL3基因是半乳糖可诱导产生，受葡萄糖抑制。与其他半乳糖可诱导基因相似，GAL3的5’侧翼区也包含UAS相似序列。因此，GAL3基因是半乳糖可诱导，葡萄糖抑制型基因家族成员，该家族还包括GAL1,GAL2,GAL7,GAL10,GAL80和MEL1。GAL3的编码区域由1,275bp的开放阅读框组成，并且该框的方向与转录方向一致。

本发明人的多肽亦包含酵母GAL3蛋白的结构特征，属于GAL3蛋白家族。

由于如上所述人半乳糖激酶11蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人半乳糖激酶11蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人半乳糖激酶11蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人半乳糖激酶11以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人半乳糖激酶11的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人半乳糖激酶11的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人半乳糖激酶11的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人半乳糖激酶11的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人半乳糖激酶11的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人半乳糖激酶11异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。