[发明专利]一种新的多肽——人p34cdc2相关蛋白激酶9和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人p34cdc2相关蛋白激酶9，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

自真核生物中鉴别的一类最大的已知蛋白超家族由蛋白激酶组成，该家族成员都有一段保守的催化核心，蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶以及蛋白酪氨酸激酶的保守催化核心相同。这些酶利用ATP(或GTP)的γ-磷酸酯以生成磷酸单酯，并把蛋白(丝氨酸及苏氨酸上)的乙醇基团与/或蛋白(酪氨酸上)的酚基作为磷酸酯受体。该超家族又可分为两个主要的亚门：蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶以及蛋白酪氨酸激酶。真核生物蛋白激酶的激酶功能域传递催化活性。

细胞分裂，细胞生长以及细胞分化是复杂的过程，在很大程度上是由磷酸化/去磷酸化调控的，因而蛋白激酶以及磷酸酶在细胞调控中起到重要作用。蛋白激酶家族成员调节多种蛋白的活性，包括激酶，磷酸酶，转录因子，细胞周期蛋白，代谢酶以及结构蛋白。细胞周期至少部分是由称为细胞周期蛋白依赖激酶(CDKS)的蛋白激酶亚家族所调控的。这些蛋白激酶包括一个催化域，它需要与名为细胞周期蛋白的调节亚基相连，这对于复合物的激酶活性是必须的。细胞周期蛋白/细胞周期蛋白依赖激酶复合物在细胞周期的不同点都是必须的。在多种人类肿瘤中，细胞周期蛋白依赖激酶去调控或发生突变。p34cdc2蛋白激酶在细胞周期中调控重要的转换。现已发现人体中有多种p34cdc2蛋白激酶相关蛋白，它们在结构上与p34cdc2有高度同源性。其中，cdk3基因，cdc2以及cdk2基因的蛋白产物作用于哺乳动物的细胞周期调控。Cdc2-相关激酶的大家族与细胞周期蛋白的大家族共同调控细胞周期(van der Heuvel,S.and Harlow,E.,Science 1993,262,2050-2054)。

PCTAIRE-2是一种细胞周期蛋白依赖激酶，也是一种蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶，因为含有与p34cdc2蛋白激酶相关的N-端延伸域，又称为p34cdc2相关蛋白激酶。PCTAIRE-2与多种细胞增殖疾病有关，例如牛皮藓，血管病以及癌症(Meyerson M,Enders GH,Wu CL,Su LK,Gorka C,Nelson C,Harlow E,TsaiLH,EMBO J 1992 Aug；11(8):2909-17)。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株、砷刺激6小时的L02细胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小肠、胎大肠、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎肾、胎脾、胎脑、胎肺以及胎心中，本发明的多肽的表达谱与人p34cdc2相关蛋白激酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人p34cdc2相关蛋白激酶9。

由于如上所述人p34cdc2相关蛋白激酶9蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人p34cdc2相关蛋白激酶9蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人p34cdc2相关蛋白激酶9蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人p34cdc2相关蛋白激酶9以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人p34cdc2相关蛋白激酶9的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人p34cdc2相关蛋白激酶9的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人p34cdc2相关蛋白激酶9的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人p34cdc2相关蛋白激酶9的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人p34cdc2相关蛋白激酶9的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人p34cdc2相关蛋白激酶9异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。