[发明专利]一种新的多肽——人遍在蛋白C端水解酶9和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人遍在蛋白C端水解酶9，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

遍在蛋白C端水解酶(UCH)可水解遍在蛋白C端加合物以产生遍在蛋白单体。遍在蛋白C端水解酶在神经元中普遍表达，尤其是在中枢神经系统及与它们相关的肿瘤中特异表达(Doran et al.,1983)。

遍在蛋白C端水解酶在反向平行的β折叠的两个侧面都有α螺旋，β折叠与其中的一个α螺旋组成的结构类似于类木瓜蛋白酶半胱氨酸水解酶中的结构，高度相似于组织蛋白酶B中的结构。UCH的活性催化位点由Cys、His、Asp及氧阴离子洞Gln残基构成。它在残基一百多位的位置有20个无序的氨基酸残基组成的噜噗，涉及底物(遍在蛋白)识别的功能。UCH的底物结合变构位点位于活性催化位点裂缝上(Johnston SC et al.1997)。遍在蛋白C端水解酶家族蛋白KIAA1097开放读框序列编码980个氨基酸，在ORFs下游有短的重复序列Alu、MIR(Kikuno R.Et al.,1999)。

遍在蛋白C-端水解酶基因的错义突变可引起其活性的部分丧失，并引起遍在蛋白水解与群聚的异常(Leroy et al.1998)。

UCH可在路易小体(Lewy bodies)出现，在蛋白酶体通路中起作用，并涉及帕金森氏病。

UCH基因突变可引起鼠细轴突营养失调，在幼年时期就导致感觉共济失调，然后引起运动共济失调。在病理上发现轴突的退化与神经末梢球状体的形成(Yamazaki et al.,1988)。

人类神经系统退行性疾病的病理研究发现遍在蛋白结合物的渐进累积，并发现了UCH基因，此外，UCH基因还在睾丸组织中发现(Suh et al.1995；Saigoh etal.,1999；MacDonald 1999)。

编码人遍在蛋白C端水解酶9的多聚核苷酸，及其所编码的人遍在蛋白C端水解酶9的发现为研究细胞在正常及病理条件下的分化、增殖的生理生化过程提供了一种方法，也为诊断、治疗与细胞分化增殖紊乱而造成的疾病包括癌症提供了一种新途径。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株、砷刺激6小时的L02细胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小肠、胎大肠、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎肾、胎脾、胎脑、胎肺以及胎心中，本发明的多肽的表达谱与人遍在蛋白C端水解酶28的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人遍在蛋白C端水解酶9。

由于如上所述人遍在蛋白C端水解酶9蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人遍在蛋白C端水解酶9蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人遍在蛋白C端水解酶9蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人遍在蛋白C端水解酶9以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人遍在蛋白C端水解酶9的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人遍在蛋白C端水解酶9的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人遍在蛋白C端水解酶9的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人遍在蛋白C端水解酶9的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人遍在蛋白C端水解酶9的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人遍在蛋白C端水解酶9异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。