[发明专利]一种新的多肽——p62cdc6蛋白24和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--p62cdc6蛋白24，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

酵母DNA复制起始于一些分散的染色体位点，这些位点集中于包括起始结合蛋白ORC以及几种相关因子的前复制复合物体系。其中的不稳定蛋白Cdc6p和cdc18+分别是酿酒酵母和裂殖酵母DNA复制起始的限速必须蛋白，同时也参加保证在有丝分裂开始以前DNA复制完成的监督调控过程。生物学家最近又发现了一个与cdc18+/Cdc6p非常相关的蛋白，p62^cdc6。p62^cdc6包括依赖细胞因子激酶磷酸化位点，一个核甘酸结合位点/ATP酶结构域，以及一个亮氨酸拉链结构。复制复合体系里的相关蛋白在结构上相对保守，表明他们的基本特征在所有真核生物中是一致的。

CDC6和cdc18+基因表达于酵母细胞循环的特异阶段[Piatti,S.,Lengauer,C.& Nasmyth,K.(1995)EMBO J.14,3788-3799][Kelly,T.J.,Nurse,P.& Forsburg,S.L.(1993)Cold Spring Harbor Symp.Quant.Biol.58,637-644]。人的p62^cdc6基因起始区域包括E2F转录因子的的结合位点，表明p62^cdc6蛋白是酵母起始控制蛋白Swi/MBF蛋白的同系物，它的表达与人类细胞周期的调节和有丝分裂刺激有关[R.SAnders Williams,Ralph V.et al.,1997,Proc.Natl.Acad.Sc i.U.S.A94(1),142-147]。

p62^cdc6克隆cDNA包括一个210nt的5’UTR和763nt的3’UTR，终止开放阅读框的3’UTR下游终止序列内的多个非移码终止密码。

p62^cdc6蛋白中的亮氨酸拉链为蛋白质之间的反应提供了一个位点，该位点对于DNA的复制起始至关重要。在该蛋白质的中心区域部分有一个在CDC6和cdc18+蛋白中都保守的核甘酸结构域，这表明p62^cdc6蛋白作为一个人复制起始蛋白有着ATP酶的活性。

实验表明，p62^cdc6与肿瘤的表达有关。它一般表达于原癌基因的起始阶段或肿瘤发育的晚期。另外，人p62^cdc6还是限制人类疾病细胞增殖药物的靶蛋白。

命名：p62^cdc6蛋白24

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株、砷刺激6小时的L02细胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小肠、胎大肠、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎肾、胎脾、胎脑、胎肺以及胎心中，本发明的多肽的表达谱与p62cdc6蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为p62cdc6蛋白24。

由于如上所述p62cdc6蛋白24蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的p62cdc6蛋白24蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新p62cdc6蛋白24蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--p62cdc6蛋白24以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码p62cdc6蛋白24的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码p62cdc6蛋白24的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产p62cdc6蛋白24的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--p62cdc6蛋白24的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--p62cdc6蛋白24的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与p62cdc6蛋白24异常相关的疾病的方法。