[发明专利]一种新的多肽——G－beta相似蛋白29和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--G-beta相似蛋白29，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

转导素是一种可激活cGMP特异性磷酸二酯酶的G蛋白。β-转导素(G-β)是G蛋白三个亚基中的一个，这三个亚基是GTP结合蛋白的异源三体。β-转导素在转膜受体产生的信号转导中起承上启下的作用，即它在各种各样的生理反应中起着转膜信号转导中间体的作用，这些生理反应包括视觉和激素反应。α亚基结合并水解GTP，属于GTP酶超家族；β亚基和γ亚基则是GTP置换GDP以及膜锚定和识别受体所必须的，同时也参与α亚基的钝化。

在高级真核生物中，G-β属于一个小的多基因含有大约340个保守氨基酸残基的家族。G-β结构由8个串联的大约40个氨基酸的重复子组成，每一个重复子包含一个中心的Trp-Asp基元(WD-40)。具有WD-40基元的蛋白通常又称WD蛋白或GH-WD蛋白(GH代表甘氨酸-组氨酸)。这样的重复结构存在于许多蛋白中。重复结构的数目在这些蛋白中由5-8变化。在G-β和G-β类似蛋白中，重复子结构几乎分布于整个序列中，而在其它蛋白中，它们只分布于N末端，中心部分或C末端。WD重复子结构所组成的保守核心结构连接于各种不同的区域，这些区域很可能是位于表面的。最长的可变区位于GH的前面，但是其他的小的可变区则位于保守的核心区域。

WD蛋白中心核结构域有一个结构特征：[LIVMSTAC]-[LIVMFYWSTAGC]-[LIMXTAG]-[LIV MS TAGC]-X(2)-[DN]-X(2)-[LIVMWSTAC]-X-[LIVMFS TAG]-W-[DEN]-[LIVMFSTAGCN]。该特征模式的连续表达和疏水性表明WD重复子结构可能折叠成一个可变环位于GH前面，后面是一个β-片层-转角-β-片层-转角-β-片层，最后是WD重复子。很可能WD重复子之间形成稳定的分子内二聚物或四聚物。WD重复子组成的核心结构可能与其他核心相互反应，从而提供了一个表面反应的特异性活动平台。该平台的可动性为WD家族蛋白提供了一个可变的蛋白质-蛋白质之间反应的界面，并且不同的WD家族蛋白能与不同的其它蛋白质发生不同的功能反应。

Gβ相似蛋白是WD蛋白家族的真核亚家族蛋白，该亚家族蛋白的特征是有一个保守的由36-46个氨基酸组成的保守重复结构，结尾是一个色氨酸(W)和一个天门冬氨酸(D)[Simon,M.I.,StrathmanN,MP.,etal.,1991,Science252:802-808][Neer,E.J.,Schmidt,C.J.,etal.,1994,Nature371:297-300]。这些WD蛋白可以抑制许多基因的转录，他们并不是直接结合在DNA上，而是通过与DNA结合蛋白反应来发挥功能[KelEher,C.A.,Redd,M.J.,Schultz,J.,et al.,1992,Ce1168:709-719]。

Gβ相似蛋白的结构与G-β非常相似，也具有上述结构特征。本发明人的多肽与Gβ相似蛋白在蛋白质水平上有96％的相同性和97％的相似性，具有与Gβ相似蛋白相似的结构特征，属于Gβ相似蛋白家族，故命名为Gβ相似蛋白29，并推测其有相似的生物学功能。

由于如上所述G-beta相似蛋白29蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的G-beta相似蛋白29蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新G-beta相似蛋白29蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--G-beta相似蛋白29以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码G-beta相似蛋白29的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码G-beta相似蛋白29的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产G-beta相似蛋白29的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--G-beta相似蛋白29的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--G-beta相似蛋白29的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。