[发明专利]一种新的多肽——CYP－60－18和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--CYP-60-18，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

亲环蛋白和FK5 06结合蛋白(FKBP)是泛醌分子的不同家族，泛醌最初被发现是因为它能结合免疫抑制药物环孢菌素A和FK506[Sigal,N.H.and Dumont,F.J.1992,Annu.Rev.Immunol.10.,519-560][Fruman,D.A.,Burakoff,S.J.andBierer,B.E.1994,FASEB J.8,391-400]。环孢菌素A和FK506在T细胞中所发挥的免疫抑制作用同时也作为初级免疫调节元素参与基因转录调节[Clipstone,N.A.and Crabtr ee,G.R.1992,NatuRe(London)357,695-697]。环孢菌素A的免疫抑制功能使得它被广泛应用于器官移植，尽管目前还只限于肾脏[Kahan,B.D.(1989)Pharma col.Rev.42,423-434]。亲环蛋白和FKBP缺乏结构和序列一致性但都有肽基脯氨酸顺反异构酶活性并可能参与蛋白质底物的折叠。

现已发现一种新的人类亲环蛋白(CYP-60)是一种核特异性蛋白，表达于与免疫抑制核环孢菌素A毒性有关的细胞。作为亲环蛋白家族的新成员，CYP-60有与其他亲环蛋白家族成员高度同源，高度保守的序列，最可能是脯氨酸异构酶。位于389的酪氨酸是亲环蛋白的多变氨基酸，位于121的色氨酸是与环孢菌素A反应的氨基酸是与环孢菌素结合的[Pflugl,G.,Kallen,J.,Schirmer,T.,etal.,1993,Nat ure(Lodon)361,91-94]。

CYP-60广泛表达于各种组织，但表达量最高的是胸腺、胰腺、精巢和K-562细胞系，肾脏。CYP-60亚细胞和组织分布表明它与环孢菌素活动有关。在转染细胞，细胞系，正常组织片段和病理组织中发现CYP-60广泛表达于核内。这个发现很有趣，是因为一些环孢菌素蛋白的免疫抑制作用对基因的调节发生于核水平。

本发明人的多肽与CYP-60在蛋白质水平上有48％的相同性和69％的相似性，并具有与CYP-60相似的序列特征，属于CYP-60蛋白家族，故命名为CYP-60-18，同时推测其具有相似的生物学功能。

由于如上所述CYP-60-18蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的CYP-60-18蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新CYP-60-18蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--CYP-60-18以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码CYP-60-18的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码CYP-60-18的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产CYP-60-18的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--CYP-60-18的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--CYP-60-18的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与CYP-60-18异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中80-565位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-826位的序列。