[发明专利]一种新的多肽——人淀粉类前体蛋白结合蛋白12和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人淀粉类前体蛋白结合蛋白12，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

阿尔兹海默氏症(Alzheimer disease)的特点是神经元数目减少，并且在脑内的β淀粉类小体增多。β淀粉类小体是由β淀粉类小体肽(beta-amyloidpeptide,AP)构成的。AP大小约4kDa，是由β-淀粉类前体蛋白β-amyloidprotein precur sor(APP)加工而成的可溶性蛋白水解产物。研究发现，当APP发生AD相关的突变时，会导致AP分泌的增加，或者AP_1-42/AP_1-40的比值发生变化。APP的超表达或者是包含AP结构域的APP的C末端的超表达对神经元有毒害作用。

APP在高尔基体中加工为成熟的蛋白质后运输到细胞表面。之后或者被分泌出细胞外，或者成为内在蛋白固定在细胞膜上。APP起到一定的物质转运的作用。例如，将APP的YENPTY序列切除就会影响细胞表面的APP的内吞作用，还会使APP在没有到达细胞表面之前就进入细胞内途径，从而打乱了细胞内物质的运输。

APP的作用与几种细胞因子有关。其中一种是FE65蛋白。FE65可以与APP的胞质端相结合。FE65在鼠脑中大量分布，在细胞内分布在内质网/高尔基体中。FE65可以增高结合到细胞表面的APP数量，还可以提高APP和AP的分泌量。【JBiol Chem,Vol.274,Issue12,7952-7957,March19,1999】

在人中发现了几种APP的作用因子，其中一种为人hFE65L蛋白。该蛋白的C端部分可以与APP的胞质部分相互作用。对其结构的分析发现hFE65L包含几个与信号传递和调节相关的结构域，暗示其与这类功能有关。并且hFE65L与鼠FE65L同源。【Proc Natl Acad Sci USA1996 Oct1；93(20):10832-7】

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株、砷刺激6小时的L02细胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小肠、胎大肠、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎肾、胎脾、胎脑、胎肺以及胎心中，本发明的多肽的表达谱与人淀粉类前体蛋白结合蛋白13的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人淀粉类前体蛋白结合蛋白12。

由于如上所述人淀粉类前体蛋白结合蛋白12蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人淀粉类前体蛋白结合蛋白12蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人淀粉类前体蛋白结合蛋白12蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人淀粉类前体蛋白结合蛋白12以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人淀粉类前体蛋白结合蛋白12的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人淀粉类前体蛋白结合蛋白12的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人淀粉类前体蛋白结合蛋白12的方法。本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人淀粉类前体蛋白结合蛋白12的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人淀粉类前体蛋白结合蛋白12的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人淀粉类前体蛋白结合蛋白12异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。