[发明专利]一种新的多肽——CYP2J2－36和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--CYP2J2-36，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

花生四烯酸是许多生长因子、荷尔蒙和细胞因子的刺激因子，是一个重要的细胞内第二信使[Jian-Kang Chen,Dao-WenWang,1999,J.Biol.Chem.274(8):4764-4769]。P450在花生四烯酸中依赖于NADPH的环氧化作用中所起的作用已经被很好地证明[Capdevila,J.H.,Chacos,N.,Werringloer et al.,1981,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.78,5362-5366][Oliw,E.H.,Lawson,J.A.,et al.,1981,J.Biol.Chem.256,9924-9931]。花生四烯酸的环氧化作用发生于好几种器官，如肝脏、肾脏、肺等[Capdevila,J.H.,Wei,S.,Yan,J.,et al.,1992,J.Biol.Chem.267,21720-21726]。花生四烯酸的环氧化反应呈对花柱型，这种反应的不对称性是P450酶所独有的，并且多数环氧化酶属于CYP2基因家族[Zeldin,D.C.,DuBo is,R.N.,etal.,1995,Arch.Biochem.Biophys.,322,76-86]。表达于肝脏、肾脏、肺和血浆的内生性EET的手性特征确定了花生四烯酸的生物合成起源以及微体P450在花生四烯酸生物活性中所起的内生性作用[Karara,A.,Wei,S.,Spady etal.,1992,Biochem.Biophys.Res.Commun.182,1320-1325]。

EET参与调节许多生化反应，这些生化反应包括对膜流动性的调节，刺激荷尔蒙释放以及作用平滑肌，正是因为这些生化反应使得环氧化酶催化的环氧化作用非常重要。

目前已发现一个新的P450花生四烯酸单加氧酶(P450花生四烯酸环氧化酶)高表达于人的心脏，同时亦发现人的心脏也包含大量的EET。这个新发现的P450花生四烯酸单加氧酶取名为CYP2J2。

CYP2J2高表达于心脏，而在肝脏、肾脏中少有表达，在脑和卵巢中几乎没有表达[Shu Wu,Cindy RMoomaw et al.,1996,J.Biol.Chem.271(7):3460-3468]。

本发明人的多肽与CYP2J2在蛋白质水平上有45％的相同性和62％的相似性，并具有与CYP2J2相似的序列特征，属于CYP2J2蛋白家族，故命名为CYP2J2-36,并推测其具有相似的生物学功能。

由于如上所述CYP2J2-36蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的CYP2J2-36蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新CYP2J2-36蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--CYP2J2-36以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码CYP2J2-36的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码CYP2J2-36的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产CYP2J2-36的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--CYP2J2-36的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--CYP2J2-36的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与CYP2J2-36异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。