[发明专利]一种新的多肽——mTERF－42和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--mTERF-42，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

调节线粒体DNA重链下游基因转录的机制参与调节两个不同基因的不同转录活动，这两个不同基因的转录单元在靠得很近的D环起始区域有部分重叠区域[Gelfand,R.and Attardi,G.(1981)Mo l.Cell.Biol.,1,497-511]。除了在转录起始水平上起调节作用以外，两个不同的转录单元的不同表达亦参与16SrRNA和tRNA(Leu)基因之间距离的减弱现象[Kruse,B.,Narasimhan,N.and Attardi,G.(1989).Cell,58,391-397]。在这个减弱现象中扮演中心角色的是线粒体转录终止因子(mTE RF)，一个DNA结合蛋白，它保护一个28bp位于16S rRNA基因附近的下游区域tRNA(Leu)基因内的DNA片段。这个28bp的DNA片段包含一个终止子序列。在体内，mTERF能促进位于起始rRNA特异性位点转录本边缘16SrRNA-tRNA(Leu)的终止作用。

通过对mTERF结构的研究，发现两个广泛分布的基本序列和三个亮氨酸拉链基元是mTERF结合DNA所必须的。这三个亮氨酸拉链Lzla/Lzalb,Lz2和Lz3是典型的疏水性六花瓣结构，在a位置和b位置就大量存在这样的疏水氨基酸[Hurst,H.(1995)Protein Profile.Vol.2.Academic Press,London,pp.105-168]。B1和B2结构域直接参与蛋白质与靶序列的结合，并且与靶序列结合的都是单体，这与mTERF结合位点缺乏对称结构是一致的。MTERF的三个亮氨酸拉链形成一个分子内三线二级盘绕结构，这使得mTERF的结构非常紧凑。

在mTERF三个亮氨酸拉链结构中，与e和g位置的亲水性氨基酸比较，疏水性氨基酸相对丰富。Lz2和Lz3的三个α转角的方向平行想向，而Lzla/Lzlb和Lz2之间却是反向平行的。Lzla和Lzlb是DNA所必须的，在这两个重复子之间的21个氨基酸残基形成一个小的环。这些上游序列特征能帮助稳定反应。

哺乳动物的mTERF功能是出于rRNA和mRNA合成的细胞需要，它能在转录水平上调节许多基因的表达，是真核生物调控自身的一种很重要的表达方式。

本发明人的多肽与mTERF在蛋白水平上有29％的相同性和53％的相似性，并有与mTERF相似的特征序列。基于以上各点，故认为本发明的新基因为与编码mTERF基因相似，命名为mTERF-42，并推测其具有相似的生物学功能。

由于如上所述mTERF-42蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的mTERF-42蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新mTERF-42蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--mTERF-42以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码mTERF-42的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码mTERF-42的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产mTERF-42的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--mTERF-42的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--mTERF-42的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与mTERF-42异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。