[发明专利]一种新的多肽——人beta－前速激肽原12和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人beta-前速激肽原12，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

速激肽是一组小肽，存在于脑及外周组织中，它作为神经递质及激素起到重要作用。速激肽有一段普遍存在的C-端氨基酸序列，作为特征标记，即第二个亚基中的-Phe-X-Gly-Leu-Met-NH.，其中X是一个疏水或芳香族残基[Erspamer,V.,Trends in Neuroscience,4,267-269,1981]。第一个被发现的速激肽是P物质，它参与脊髓中的痛觉刺激的传递，也有的P物质从皮肤的感觉神经中释放的，并在炎症应答中起作用。后来又相继发现了其他速激肽，例如神经激肽A与B[Kimura,S.,Oada,M.,Sugita,Y.,Kanazawa,I.and Munekata,E.,ProcJap.Acad.Series B,59,101-104,1983]，还有中枢神经系统中更大的速激肽，神经肽K[Tatemoto,K.,Lundberg,J.M.,Jornvall,H and Mutt,V.,Biochem.Biophys.Res.Comm.,128,947-953,1985]。P物质衍生自两个较大的多肽前体，α-及β-前速激肽原(PPT)。编码α-及β-前速激肽原的mRNA衍生自单一的PPT基因，然后由组织特异性RNA剪切生成α-,β-前速激肽原。P物质及神经激肽A通过不同的速激肽受体发挥作用，这些受体分布于神经体系的不同位置。

β-前速激肽原是神经激肽A,P物质及神经肽K的共同前体。人beta-前速激肽原链中含有编码P物质及神经激肽A的区域，每一区域的旁侧具有碱性氨基酸残基，含有这些碱性氨基酸残基的序列是翻译后加工的位点。人β-PPT近C端有三十多个残基的序列编码神经肽K，后者是一种神经激肽A的N端延伸形式[Harmar AJ,Armstrong A,Pascall JC,Chapman K,etc.,FEBS Lett 1986 Nov10；208(1):67-72]。人β-PPT的信号序列切割位点在19位丙氨酸及20位谷氨酸之间，切割后将产生110个氨基酸长度的激素原，这一激素原经过翻译后加工产生一系列激素肽。有些人的类癌瘤是由于分泌衍生自β-前速激肽原的肽段而引起的，例如人的类喉癌肿瘤中含有高浓度的免疫反应P物质，这种肿瘤引起患者唾液分泌过多以及局部疼痛，因而β-前速激肽原及其拮抗剂，抑制剂，激动剂可用于诊断及防治某些类癌瘤疾病。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株以及前列腺组织中，本发明的多肽的表达谱与人beta-前速激肽原的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人beta-前速激肽原12。

由于如上所述人beta-前速激肽原12蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人beta-前速激肽原12蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人beta-前速激肽原12蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人beta-前速激肽原12以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人beta-前速激肽原12的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人beta-前速激肽原12的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人beta-前速激肽原12的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人beta-前速激肽原12的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人beta-前速激肽原12的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人beta-前速激肽原12异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。