[发明专利]一种新的多肽——人类促肾上腺皮质激素释放因子23和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人类促肾上腺皮质激素释放因子23，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

人类促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)是一条由41个氨基酸残基组成的单链多肽，它的C端由异亮氨酸残基组成并缺少二硫键(Shibahara,S.,Morimoto,Y.,Furutani,Y.,Notake,M.,Takahashi,H.,Shimizu,S.,Hori kawa,S.and Numa,S.(1983)EMBO J.,2,775-779)。促肾上腺皮质激素释放因子是促肾上腺皮质激素(ACTH),β-内啡肽和其它来源于前垂体腺的肽段分泌端的主要生理调节元素(Vale,W.,Spicess,J.,Rivier,C.andRivier,J.(1981)Science,21,3,1394-1397)。人类促肾上腺皮质激素释放因子可能是前导肽化学信使，通过它中央神经系统可以控制垂体-肾上腺素轴的活动从而最终启动生物体对压力的反应(Dunn,A,J.and Berridge,C.W.(1990)Brain.Res.Rev.,15.71-100)。而且异常CRF神经活动可能导致一系列的精神疾病，这些疾病包括病变性精神失常，焦虑型精神失常，神经性食欲缺乏以及老年痴呆症(Owens,M.J.and Nemeroff,C,B.(1991)Pharmacol.Rev.,43,425-473)。CRF在小分子水平与属于受体G蛋白-连接家族的膜受体蛋白反应。CRF结合于前垂体的膜组织匀浆，包含一个高亲和力0.1nM组元和一个低亲和力20nM的结合位点(DeSouza.E.B.,Insel,T.R.,Perrin,M.H.,Rivier,J.,Vale,W.W.andKuhar,M.J.(1985)Neurosci.Lett.,56.121-128)。

人类促肾上腺皮质激素释放因子包含一个延伸的N末端四肽，该四肽与一个介于氨基酸残基6和36之间的N末端α转角和C末端连接(Christophe R.JB,ChristianCambillau and Herve Darbon(1993)Protein Eng Feb,6(2)149-156)。N末端的α转角开始于一个脯氨酸残基，N末端的前四个氨基酸残基与该脯氨酸残基连接。在氨基酸残基6和20之间是两亲性氨基酸残基。氨基酸残基21和32之间的氨基酸残基缺乏明显的亲水性或疏水性，其中唯一一个丙氨酸残基可能是中性的(Kyte,J.and Doolitt le,R.(1982)J.Mol.Biol.,157,105-132)。值得注意的是这样的两亲性转角存在于大量的前叶激素中。

本发明人的多肽亦含有CRF结构，具有上述CRF的结构特征，同时推测其具有与CRF相似的生物学功能。

由于如上所述人类促肾上腺皮质激素释放因子23蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人类促肾上腺皮质激素释放因子23蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人类促肾上腺皮质激素释放因子23蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。    

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人类促肾上腺皮质激素释放因子23以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。    

本发明的另一个目的是提供含有编码人类促肾上腺皮质激素释放因子23的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人类促肾上腺皮质激素释放因子23的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人类促肾上腺皮质激素释放因子23的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人类促肾上腺皮质激素释放因子23的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人类促肾上腺皮质激素释放因子23的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人类促肾上腺皮质激素释放因子23异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：