[发明专利]一种新的多肽——人锌指蛋白19和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人锌指蛋白19，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

生物体内广泛的存在一类调控蛋白，该类蛋白通常与DNA结合形成各种结构花式，在生物体内调节各种相关基因的转录与表达。这类蛋白的调控作用需Zn离子的介导，它们构成了一很大的蛋白家族，被称之为锌指蛋白。锌指蛋白在生物活细胞中起着重要的作用，其中最重要的是作为转录调节因子发挥作用[Berg J.M.，Shi Y.et al.，Science，1996，271：1081-1085]。真核基因的转录调控对于基因的正常表达是十分重要的，通常由转录调控因子来完成这一调控过程。转录调控因子在生物体内参与决定基因在何种组织及何种发育阶段开始转录。编码这类蛋白的基因如发生突变，不但该基因自身不能正常表达，而且受其调节的许多基因也不能正常的进行转录与表达。锌指蛋白即在这些调节过程中起着重要的作用。

锌指蛋白按其与锌指结构的不同可分为各种不同的类型，如C2H2型、CCCH型、CCHC型、C3HC4型等。其中C3HC4型锌指蛋白又叫环指蛋白。这类蛋白是一种新类型的锌指蛋白，它们在金属数目，间隙，序列同源性方面都不同于以前发现的一般的锌指结合蛋白，其蛋白结构含有多个环指基元。环指基元可以简单的定义为Cys-X2-Cys-X(9-39)-Cys-X(1-3)-His-X(2-3)-Cys-X2-Cys-X(4-48)-Cys-X2-Cys，其中X是任何一个氨基酸(Freemont PS，Ann NY Acad Sci 1993，684：174-192)。研究发现，主要有两种序列类似于环指蛋白基元。一种叫LIM的结构域包含有8个保守的金属配基，其间隙与环指蛋白类似，但在单个金属之间有更大的序列保守性(Schwabe JWR，Klug A，Nat Struct Biol，1994，1：345-349)。另一种叫PHD或LAP的结构域也包含了8个保守的金属配基，同时与LTM结构域和环指基元相似(Aasland R. et al.，Trends Biochem Sci 1995，20：56-59)。

C3HC4型锌指蛋白家族成员的蛋白序列中均含有一保守的“cross-brace”结构基序，该结构基序是蛋白与锌原子的连接系统，形成活性蛋白构型疏水核心的几个保守氨基酸残基包装。这些保守的特征序列片段可能在所有环指蛋白家族中都是共有的。因此，环指基元形成了一个方便的支架系统，这个系统的结构性改变反映出该家族蛋白分子功能的多样性。

环指蛋白在生物体内主要负责调控各种相关组织基因的转录与表达，除此之外，其还在细胞内调控各种蛋白大分子的聚集及调节蛋白与蛋白之间的相互作用。环指蛋白结构域可能是潜在的同源寡聚化结构域或与其它靶蛋白作用。环指蛋白在发挥这些功能时，其分子必须是完整的。C3HC4型锌指蛋白家族成员庞大，这些蛋白几乎能在人类的各个组织、器官中表达。C3HC4型锌指蛋白在生物体内的分布非常广泛，其在体内主要具有以下各种功能：激活和重排免役球蛋白以及T细胞受体，调节调节白介素-2受体α链启动区域或HIV-1 LTR启动区域基因的表达，调节人类精子细胞的发育，连接rfp蛋白N末端和酪氨酸激酶产生ret转化蛋白，与哺乳动物乳腺癌有关，稳定CDK激酶和细胞周期蛋白H复合体，作为转录因子与多种肿瘤发生有关。

本发明的新的人锌指蛋白亦具有以上所述的C3HC4型锌指蛋白家族的保守的C3HC4锌指结构域及“cross-brace”结构基序，其为人C3HC4锌指蛋白家族的新成员，并与该蛋白家族的其它成员具有相似的生理学功能。该蛋白在生物体内与免疫系统、生殖系统的各种相关基因的转录与表达相关，其表达异常，通常与一些发育紊乱性疾病、生殖系统疾病、各种免疫紊乱性疾病及相关组织的肿瘤及癌症的发生等密切相关。其还可用于诊断及治疗上述各种疾病。

由于如上所述人锌指蛋白19蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人锌指蛋白19蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人锌指蛋白19蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人锌指蛋白19以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。