[发明专利]一种新的多肽——人ATP依赖的RNA解螺旋酶53和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人ATP依赖的RNA解螺旋酶53，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

在细胞的众多活动中，RNA结构的调控如：前体RNA的剪接、剪接体的装配、蛋白翻译等都是必需的调节步骤。这些过程通常由各种不同的解螺旋酶来调节完成。解螺旋酶在很多RNA起重要作用的生物系统中均可检测到。它们广泛地分布于从原核生物(包括病毒)到低等及高等生物的各组织器官中，参与细胞核及线粒体的分裂、RNA的编辑、rRNA的加工、转录起始、，细胞核mRNA的转运及mRNA的降解等过程。解螺旋酶被认为是细胞发育及分化过程中的重要因子，其中的一些还在病毒单链RNA的转录及复制过程中起作用[Arri Eisen,John C.Lucchesi,Bioes says,1998,20:634-641]。其在生物体内为癌症、神经系统疾病及免疫系统疾病的诊断、预防及治疗提供了有效的手段。

研究发现，ATP依赖的解螺旋酶超家族的成员含有多个保守的序列基序，其中一些是该家族的成员所特异的；而另一些不仅在该家族成员中存在，且在一些ATP结合蛋白中亦存在。这些序列基序中的一个为“D-E-A-D盒”，存在于ATP结合蛋白的B基序中。该解螺旋酶超家族中的另一些成员含有一“D-E-A-H盒”，该盒有组氨酸残基替换了“D-E-A-D盒”中的天冬酰胺，该盒结构基序是解螺旋酶超家族所特异的。该结构基序是调节ATP水解与否的关键位点，其突变将导致ATP水解的抑制，从而影响酶发挥正常的生理学功能。ATP依赖的解螺旋酶是细胞发育及分化过程中的重要调节因子，其在生物体内通常与一些神经系统疾病、免疫系统疾病、肿瘤及癌症等疾病的发生相关。

人们已从酵母、人等各种高等生物体内克隆到了该蛋白家族的成员，这些不同来源的蛋白在生物体内均有着相似的结构特征，且起着相似的功能，在生物体内RNA的转录与加工过程中起重要的调控作用。1999年，Christel Schmitt等人从人中克隆得到了hDbp5蛋白，该蛋白与酵母的Dbp5蛋白有较高的同源性，在生物体内负责将RNA从细胞核转运至目的细胞，解螺旋形成具有生物活性的构型，以发挥其生理学功能。它们均通过与核孔蛋白CAN/NUPl59PN末端的相互作用来调节这一转运过程[Chri stel Schmitt,Cayetano von Kobbe et al.,1999,The EMBO Journal,18:4332-4347]。该蛋白的表达异常通常将影响生物体内相关蛋白的表达异常，如相关组织细胞的异常增殖、一些中间调控蛋白的表达异常等。其与生物体内各种相关的发育紊乱性疾病、肿瘤及癌症、免疫系统疾病的发生均有一定的关系。

1994年，Gee SL等人又从鼠的血红细胞中克隆得到了一ATP依赖的RNA解螺旋酶-----MDEADS。该蛋白亦为解螺旋酶家族的新成员，在生物体内参与核糖体的聚合、前体mRNA的剪接及RNA的稳定等多种生理学过程。该蛋白的多肽序列中亦含有RNA解螺旋酶家族的保守的“DEAD/H盒结构”。该蛋白从RNA水平调节着各种相关组织基因的转录与表达。其表达异常通常与一些血液系统疾病、白血病、相关组织的肿瘤及癌症等的发生密切相关[Gee SL,Conboy JG et al.,1994,Gene,140:171-177]。

本发明的新的人ATP依赖的RNA解螺旋酶与鼠的MDEADS蛋白在蛋白水平上有68％的同一性和86％的相似性，两者均为解螺旋酶超家族的成员，且与该家族的其它成员相似，具有相似的功能特征。本发明的人ATP依赖的RNA解螺旋酶在生物体内亦从RNA水平调节着多种基因的转录与表达，该蛋白的表达异常通常与生物体内多种血液系统疾病、相关组织的肿瘤及癌症、白血病等的发生相关。其还可用于诊断及治疗上述各种疾病。

由于如上所述人ATP依赖的RNA解螺旋酶53蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人ATP依赖的RNA解螺旋酶53蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人ATP依赖的RNA解螺旋酶53蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人ATP依赖的RNA解螺旋酶53以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。