[发明专利]一种新的多肽——脂蛋白7,87和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——脂蛋白7,87，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

粘附素脂蛋白家族由支原体himinis中p50及不同的与粘附有关的抗原蛋白构成。

支原体himinis是一种与人类尿生殖疾病，肺炎，以及脓毒性关节炎相关的支原体。粘附素是一种介导粘附于其他细胞或是到周围表面或是到底物上的脂蛋白。Vaa是支原体himinis中的一种粘附素，Vaa抗原是一种50Kda的表面脂蛋白，它具有四个串联且重复的DNA序列，位于中心区域，编码一个周期性多肽结构，其N端及重复区域含有高度保守的序列，而在C端域作为粘附介导组件却变化各异，这可能与各类菌株把不同单克隆抗体与Vaa产物结合有关。Vaa抗原在与支原体himinis感染有关的慢性，活动性关节炎中表达，在人体宿主中是高度免疫原型的。菌株大小不同以及Vaa的C端免疫原性不同会影响支原体himinis的粘附性以及失去抗体介导的免疫性，从而导致人体宿主中的器官产生适应能力。

p50也是支原体hominis的粘附素，是一种50-KDa的脂蛋白，具有A,B及C三种重复，该序列模板几乎占据整个蛋白的四分之三，在其原有环境中可能是一种191-Kda的四聚体，呈螺旋结构并有一个亮氨酸锌指。p50的特异性单克隆抗体抗原决定部位位于蛋白的中间以及C端，且不同的单克隆抗体都结合于相同的三个折叠，重复的氨基酸序列模板区域，这些重复域高度同源但在结构上不尽相同，可被单克隆抗体区别。

本发明的多肽，脂蛋白7也是粘附素脂蛋白家族成员，大小为50Kd。与Vaa及p50一样，介导粘附作用，其特异性单克隆抗体抗原决定部位同样位于蛋白的中间以及C端，具有高度同源的重复域，但在结构上不尽相同，可被单克隆抗体区别。脂蛋白7及其拮抗剂，抑制剂，激动剂可用于诊断，防治与支原体himinis感染有关的疾病，例如慢性，活动性关节炎等。

由于如上所述脂蛋白7,87蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的脂蛋白7,87蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新脂蛋白7,87蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——脂蛋白7,87以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码脂蛋白7,87的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码脂蛋白7,87的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产脂蛋白7,87的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——脂蛋白7,87的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——脂蛋白7,87的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与脂蛋白7,87异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中260-2641位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-2775位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制脂蛋白7,87蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。