[发明专利]新的分子量为13KDa的人神经元线蛋白及其编码序列

说明书

本发明属于生物技术领域和遗传工程领域，具体地说，本发明涉及了一种新的多肽——分子量为13KDa的人神经元线蛋白(Novel Human Neuronal Thread Protein 13KDa,简称“BioHNTP13”)，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

神经元线蛋白(NTP)是一个在神经轴突萌发时表达的磷蛋白家族。神经元线蛋白积累在老年痴呆症患者、唐氏综合症患者的脑组织中，在神经元和星形细胞中均有发现，它在正常和病变的神经轴突萌发时均起关键作用。其中15-18KD的神经元线蛋白与神经元的分化和发展有关，在成熟的中枢神经系统受损后的神经元再生过程中起作用。神经元线蛋白可能受到中枢神经系统损害和休克的调节[de la Monte SM,et al.,J Cereb Blood Flow Metab1997；17:623-35]。

神经元线蛋白构成一个表达在脑和原始神经外胚层肿瘤细胞株中的分子家族。在老年痴呆症患者的神经元核周质、神经纤维、轴突中它有高水平表达。在老年痴呆症患者中，AD7c-NTP单抗可标记退化的神经元、轴突球、营养不良神经炎和不规则神经纤维等[De LaMonte SM,et al.,J Neuropathol Exp Neurol 1996；55:1038-50]。NTP的表达受DNA合成、神经轴突萌发、神经元分化等调节。乙醇可能抑制与中枢神经系统的神经元分化有关的NTP表达[Xu YY,et al.,Biochem J 1995；310:125-32]。

研究发现，神经元线蛋白及其编码的多核苷酸与老年痴呆症、唐氏综合症、神经系统肿瘤等疾病有关。因此，为治疗目的研究和开发人的神经元线蛋白有重要意义。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——分子量为13KDa的人神经元线蛋白(简称为“BioHNTP13”)以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该BioHNTP13多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码BioHNTP13的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码BioHNTP13的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产BioHNTP13的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的BioHNTP13多肽的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明BioHNTP13多肽的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断和治疗与BioHNTP13异常相关的疾病的方法。

在本发明的第一方面，提供新颖的分离出的分子量为13KDa的人神经元线蛋白(BioHNTP13)，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物、类似物。较佳地，该多肽是具有SEQID NO:2氨基酸序列的多肽或其氨基酸变异不超过5％的衍生物。

在本发明的第二方面，提供分离的编码这些多肽的多核苷酸，该多核苷酸包含一核苷酸序列，该核苷酸序列与选自下组的一种核苷酸序列有至少70％相同性：(a)编码上述BioHNTP13的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。较佳地，该多核苷酸编码具有SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的多肽。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中107-460位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-3513位的序列。

在本发明的第三方面，提供了含有上述多核苷酸的载体，以及被该载体转化或转导的宿主细胞或者被上述多核苷酸直接转化或转导的宿主细胞。

本发明的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。

下列附图用于说明本发明的具体实施方案，而不用于限定由权利要求书所界定的本

发明范围。

图1是本发明的分子量为13KDa的人神经元线蛋白(BioHNTP13)和Homo sapiens的神经元线蛋白(AF010144)的氨基酸序列同源性比较图。相同氨基酸在两个序列间用单字符氨基酸表示，相似氨基酸用“+”表示。图2为分离的分子量为13KDa的人神经元线蛋白(BioHNTP13)的聚丙烯酰胺凝胶电泳图(SDS-PAGE)。13kDa为蛋白质的分子量，箭头所指为分离出的蛋白条带。