[发明专利]一种胃粘膜幽门螺杆菌的检测方法

说明书

本发明涉及一种胃粘膜幽门螺杆菌(HP)的检测方法。

胃粘膜幽门螺杆菌(HP)的检测，对胃粘膜病变的防治及病因研究具有重要意义。近年来经专家对10余种检测方法分析比较，认为染色效果除了经典的螺旋菌染色方法W.S和细菌学染色方法Gram、GiemSa，碱性品红法为最优。碱性品红法虽然效果逊于经典染色法，但其方法比较简单，染色时间短，现已被国内病理界认为是检测HP的最佳方法。但是，碱性品红也存有缺陷：一是碱性品红法为两步法，其中的分化步骤非常重要，但要掌握恰当有一定难度，分化不够则着色太深，分化过度则着色太浅，且一张片子都可能有深有浅，而太深或太浅都直接影响HP的检出，易造成的阴性结果；另一方面，碱性品红法为鲜艳的玫瑰红色，检测人员观测镜头时间久了易引起眼睛疲劳。

本发明的目的就是提出一种胃粘膜幽门螺杆菌(HP)的检测方法，通过改变试剂的配制，简化了步骤并增强了染色效果，克服了碱性吕红法的缺陷。

本发明的技术方案是这样实现的：一种胃粘膜幽门螺杆菌(HP)的检测方法，采用胃大部切除标本或胃粘膜活检组织，常规石腊切片，厚4-5um，经二甲苯脱腊，逐级乙醇，自来水冲洗干净后加染液，10秒钟后流水洗净干燥后，二甲苯透明、中性树胶封片镜检，其特征在于染液试剂组分的配制比例是：在0.2-0.5g美兰试剂中加入100ml蒸馏水。

本发明与已有技术比较所具有的优点和积极效果是：由于采用上述技术方案，一是省略了碱性品红法的分化步骤，只有一步操作，染色时间仅为10秒，并且是在常温下操作，不需特殊设备和环境要求，特别适合于大样本和普查检测；二是敏感性强，检出率高，实施上述方法后，镜下的HP呈深宝石蓝色，形状弯曲或为棒杆状，主要位于胃腺小凹表面的腺腔粘液内，周围组织呈淡天蓝色，细胞呈草黄绿色，对比度强，层次分明，即使在胞浆中或与组织重叠在一起也非常容易检出，阳性提出率达100％；三是染液试剂的配制经济方便，所用试剂为美兰单一试剂，配制简单，且试剂安全，稳定无毒，价格低廉，检测一例试剂成本不足一角钱。

以下用实施例对本发明做进一步阐述。

实施例1：首先用市购成品美兰试剂0.2g加入100ml蒸馏水配制成染液试剂。再采用胃粘膜活检组织，常规石蜡切片，厚4-5um，经二甲苯脱蜡，逐级乙醇，自来水冲洗后加染液，10秒钟后流水洗净干燥后，二甲苯透明、中性树胶封片镜检。镜下HP是深宝石蓝色，形状弯曲或棒杆状，周围组织呈淡天蓝色，细胞呈草黄绿色，对比度强，层次分明。

实施例2：用市购成品美兰试剂0.4g加入100ml蒸馏水配制成染液试剂，按实施例1的同样操作方法并获得同样的检测效果。