[发明专利]多肽的制备工艺

说明书

本发明属生物制品领域，具体是一种多肽的制备工艺。

多肽(又称多聚肽、胶原多肽)通常含有19种氨基酸，比人乳蛋白质所含氨基酸还多两种，其中包括成人必需的七种氨基酸和儿童生长发育所需的两种半必需氨基酸。多肽具有极高的医疗、营养保健、美容护肤等功效。我国医药、化妆品等所需主要靠进口。进口多肽多以新鲜哺乳动物皮为原料，采用酸法或碱法制得，如日本专利JP8027035A。酸水解法迅速而彻底，但色氨酸全部被破坏，丝氨酸和酪氨酸部分被破坏，且产品得率低，设备腐蚀严重，并产生二次污染。碱水解法水解也迅速彻底，但含羟基和巯基的氨基酸全部被破坏，且产生消旋作用(结构变异)。因此酸碱水解法生产的多肽因部分氨基酸结构变异、使其生物活性、营养保健、美容功效降低。中国专利(CN1155549)及文献报导，以哺乳动物结缔组织为原料，采用酶或有机酸提取医用、化妆品用胶原蛋白和多肽，所用原料昂贵、成本高、工艺较繁琐、生产周期长、产品得率低。

本发明的目的在于提供一种多肽的制备工艺，采用廉价原料，在温和条件下制备无变性的多肽，对环境友好，无毒害污染物产生，生产成本低，产品得率高。

本发明的目的是通过如下技术方案来实现的：

以制革副废物废碱皮边角或/和碱二层皮为原料，经水洗后，用物理和化学方法相结合预处理原料，预处理工艺为：100份原料，加水40～60份、氯化铵5～20份、盐酸1～4份，处理30～90分钟，用水清洗干净，清洗后的原料加水100～200份、乳化剂O 0.5～2份、乳化剂Tween-65 0.5～2份，常温处理30～90分钟，用水清洗干净，预处理后的原料碎化成小块，加水80～150份，NaCl 3～15份，盐酸0～5份，66％H₂SO₄ 0～1.5份，处理1～6小时，去液，水清洗，加NaOH 0.5～1份，调pH6.5～7.5备用，使皮胶原纤维束充分松散、某些键被打断而分离，继而转化为均匀的原胶原分散体系，再进行酶解，酶解工艺为：取处理后的原料100份，加水50～150份，温度为35～40℃，胰蛋白酶0.5～0.8份，反应30～90分钟，加微生物酶0.8～1份和中性蛋白酶、地衣芽孢杆菌酶中的一种或二种，其中中性蛋白酶0.5～0.7份，地衣芽孢杆菌酶0.2～0.5份，调pH值8.5～9，升温到45～50℃，保温30～90分钟，加胃蛋白酶、木瓜蛋白酶中的一种或二种，其中胃蛋白酶0.1～0.4份，木瓜蛋白酶0.3～0.7份，处理2～4小时，然后在80～90℃，加热10～20分钟，使酶失活，再经过滤、除盐纯化、真空浓缩、喷雾干燥，在无菌条件下收集、分装即得多肽。    

现有生产医用、食用、化妆品用多肽均为新鲜动物或骨，而本技术采用的原料是制革生产回收的工业副废物碱皮边角余料和碱二层皮，化害为利，变废为宝，因而前者成本高，原料有限，后者成本低，原料极为丰富，市场潜力大。

本发明的关键技术之一是用物理方法和相对较弱的酸碱预处理松散、分离皮胶原纤维束，为酶切反应的高效、均一奠定了良好基础。因为是在常温条件下(10～30℃)的弱酸碱预处理，绝不会导致构成氨基酸残基发生结构变异。

关键技术之二是提取反应是在低温下(35～50℃)，用有严格选择性的生物酶制剂有目的地进行提取，易控制。产物的组成结构、性能功效稳定，变异小。而高温条件下的酸碱处理法，处理的任意性很大，产物的分子量分布宽、组成结构、性能功效差异大，甚至部分氨基酸残基结构被破坏，丧失其特定的生物活性。

国内外未见有用生皮副废物制备多肽的专利文献报导。

本技术经济效益显著，社会环境效益突出，我国年皮革加工量占世界的1/5，居世界第一位，每年产生未鞣制生皮副废物约70万吨，因未得到适当地利用，不仅造成数十亿元经济损失，且腐烂变质造成极大的环境污染，严重地影响到制革工业的可持续发展。本技术将制革副废物转化为高附加值的多肽，其氨基酸总量超过90％。不仅可创造显著的经济效益，且生产过程中基本不产生二次污染，属环境友好和绿色化工工业，这对促进农牧业、制革及皮件等工业的良性发展起到积极的作用。

下面是本发明的实施例。

实施例一

选取皮革加工过程中产生的废碱皮块(边角)，用或自来水清洗干净。

100g碱皮块，加水40g、氯化铵5g、盐酸2g处理60分钟，用去离子水清洗干净。

清洗后的原料加去离子水120g、乳化剂O 0.5g、乳化剂Tween-65 1g，常温处理80分钟；用去离子水清洗干净。

用机械切成小块。