[发明专利]冻干甲肝、腮腺炎二联活疫苗

说明书

冻干甲型肝炎减毒活疫苗研制成功，从根本上解决了液体剂疫苗有效期短且需冷链运输等问题，也保证了免疫效果。

冻干流行性腮腺炎活疫苗是预防流行性腮腺炎有效制剂。

预防甲肝和流行性腮腺炎需要分别注射冻干甲型肝炎减毒活疫苗和冻干流行性腮腺炎活疫苗。

本发明专利冻干甲肝、腮腺炎二联活疫苗实现了两种疫苗联合，接种一次预防两种传染病的效果。

技术方案：

1.疫苗制备

(1)甲型肝炎减毒活疫苗系用L-A-1株甲型肝炎病毒，接种人胚肺二倍体细胞(2BS)，经37℃病毒吸附，加维持液置35℃培养4周，洗换后加疫苗液，冻化超声去除细胞碎片，合并疫苗液，超滤浓缩5倍即为甲型肝炎减毒活疫苗浓缩疫苗原液。

(2)流行性腮腺炎活疫苗系用上海S₇₉减毒腮腺炎疫苗株，感染SPF鸡胚细胞，经33℃培育，当细胞出现病变后，倒去培养液，换疫苗液，继续培养，当病变达“++”“+++”后，放2—8℃ 18h，使病毒充分释放后，收获疫苗液，即为腮腺炎疫苗液。

2.冻干

将上述(1)(2)两种疫苗液等量混合，按4∶1加入冻干保护剂，保护剂在混合疫苗中最终浓度分别为：海藻糖1-6％、明胶0.4-09％、蔗糖3-6％、乳糖2-6％、味精0.5-2％、尿素0.3-0.8％、L-精氨酸0.1-0.4％。加入保护剂的疫苗液，每支分装1.0ml，装入冻干箱内，在-40℃以下冻结4小时，开始干燥，冷凝器、真空度达正常状态后1小时逐渐加温，待制品在-20℃以下时升华，待制品成型后逐渐升温至28℃，控温8-10小时，干燥结束。冻干后制品是淡黄色疏松体，水份≤3％(g/g)。主要专有设备有：细胞培养转瓶机、医用冷冻干燥机等。

检定

(1)甲型肝炎疫苗病毒滴度测定：病毒滴度≥6.5LogCCID₅₀，37℃7天病毒滴度下降≤1.0Log。

(2)流行性腮腺炎疫苗病毒滴度测定：病毒滴度≥4.0LogCCID₅₀/1.0ml，37℃放置7天滴度下降≤1.0Log。

(3)无菌试验、安全试验按《中国生物制品规程》进行，全部合格。

4.冻干剂型甲肝、腮腺炎二联活疫苗，稳定性好，易于保存，减少液体疫苗冷链运输和稳定性差的问题，2-8℃保存有效期可达18个月。

注射一针可预防两种传染病，方便使用。

重组、重配和联合疫苗以及质粒DNA注射等现代疫苗学代表了全球传染病预防和控制的令人振奋的新纪元。