[发明专利]新的链霉菌菌株及其相关用途

说明书

本发明涉及新的东方链霉菌(Streptomyces orientalis)及产黑链霉菌(Streptomyces melanogenes)菌株，及其用途。

有许多种昆虫会造成农业上重大经济损失，并在植物之间散播病害，粉虱为全世界最恶名昭彰的农业害虫之一。例如：1981年时，烟草粉虱(Bemisia tabaci)(Gennadius)造成美国棉花、葫芦及莴苣1亿美元损失。1986年时，粉虱成为佛罗里达州的问题，烟草粉虱使佛州价值800至1000万美元的圣诞红受到约2百万美元的损失。

现在已知粉虱啃食500种以上不同的植物。例如：番薯、番茄、豆类、棉花、胡萝卜、树薯、南瓜类、莴苣、辣椒、茄子、西瓜、及小黄瓜为这种害虫的公知宿主。亦已知烟草粉风会传播70种以上虫病毒与微生物引起的病害。

1991年时，台湾首次出现银叶粉虱(B.argentifolii Bellows及Perring)。1995年时，银叶粉虱造成台湾1000公顷的农业损失。

粉虱很难利用公知的杀虫剂施药法控制。有许多因素造成杀虫剂防治工作上的漏洞。只有少数几种杀虫剂商品可有效控制粉虱。然而，这些杀虫剂必须一周彻底施用数次才有效。此外，粉虱的大部份生命期都留在叶子背面；因此，种植者必须调整他们的操作法才可提高除虫剂的覆盖范围。植物之间隙必须足使化学喷洒剂可渗入树顶并到达植物所有表面。

此外，无效率的使用化学除虫剂耗费成本，并有其他显著缺点，如：环境污染，且对农民及消费者有潜在健康危害。

因此需要更安全且更有效的防治粉虱方法。虽然生物性防治剂已研究有年，但目前仍无生物性防治剂商品可以成功防治粉虱。

USP 4,942,030及USP 5,413,784揭示利用真菌玫烟色拟青霉(Paecilomyces fumosoroseus)及白僵菌(Beauveria bassiana)防治烟草粉虱。

链霉菌属已广泛用于制造抗生素，然而迄今仍未鉴定出具有对抗粉虱的生物性杀虫活性的链霉菌属。

现已惊人地发现链霉菌属新菌株，称为东方链霉菌Y31014及产黑链霉菌Y31042-1，这些菌株具有对抗粉虱的活性。

因此，本发明一方面提供新菌株东方链霉菌Y31014及产黑链霉菌Y31042-1。

本发明第二方面提供含该新菌株的生物性杀虫剂组合物。

本发明另一方面，提供经由害虫与新菌株接触来防治害虫的方法。

微生物之鉴定与特性分析

新的Y31014及Y31042-1菌株是自台湾省苗栗地区的土壤样本中分离。这些微生物经过台湾省新竹食品工业发展研究所鉴定，分别为东方链霉菌及产黑链霉菌。其方法与结果如下：

采用国际链霉菌计划(International Streptomyces Project)(ISP)为分析链霉菌属特性所建议的方法分析分类学与形态学特性。

1．细胞壁分析

取干细胞(10毫克)置入含1毫升6N HCl的试管中，于100℃下水解18小时。水解液过滤及干燥。干粉溶于0.4毫升蒸馏水中，倒至PTLC板上。采用甲醇-H₂O-6N HCl-吡啶作为展开溶液。然后在风干后施用茚三酮。二氨基庚二酸(DAP)产生黄绿色，而其他氨基酸则产生紫红色。参见柯马加塔(Komagata)等人，“细胞分类的脂质与细胞壁分析法”(Lipid and Cell Wall Analysis in BacterialSystematics),Meth.Microbiol.19:161-207(1987)。

2．全细胞糖分析法

取干细胞(50毫克)置入含1毫升1N H₂SO₄的试管中，于100℃下水解2小时。利用饱和Ba(OH)₂调整水解液pH至5.0-5.5的范围内。水解液离心，收集上层悬浮液，并浓缩。浓缩物溶于0.4毫升蒸馏水中，然后点至滤纸上。采用N-甲醇-H₂O-吡啶-甲苯作为展开溶液。施用苯胺酞酸酯使糖类显色。6碳糖在风干后产生褐色，5碳糖则产生粉红色。参见柯马加塔等人，“细菌分类学的脂质及细胞壁分析法”，Meth.Microbiol.19:161.207(1987)。

3．菌株培养特性分析