[发明专利]分泌性融合蛋白的酵母表达无效
| 申请号： | 99116862.3 | 申请日： | 1999-09-10 |
| 公开（公告）号： | CN1148452C | 公开（公告）日： | 2004-05-05 |
| 发明（设计）人： | 楼觉人 | 申请（专利权）人： | 上海兆安医学科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/62 | 分类号： | C12N15/62;C12N15/27;C12N15/24;C12N15/64;C12N15/81;//;C12R1∶84) |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所 | 代理人： | 徐迅 |
| 地址： | 200021上海市淮海*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及在酵母中表达分泌性的粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素3(IL-3)的融合蛋白(简称为“MX融合蛋白”)的方法，还涉及生产该融合蛋白的工程菌和所生产的融合蛋白MX。本发明的MX融合蛋白基因十分稳定，可调控表达，且产物为天然氨基酸蛋白序列，无置换突变。 | ||
| 搜索关键词： | 分泌 融合 蛋白 酵母 表达 | ||
【主权项】：
1、一种表达分泌性的粒细胞巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素3的融合蛋白MX的方法，其特征在于，该方法包括：(a)将粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的编码序列和白细胞介素3的编码序列融合在一起，形成编码融合蛋白MX的多核苷酸序列，所述的多核苷酸序列编码氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的融合蛋白；(b)将步骤(a)中编码融合蛋白MX的多核苷酸序列插入到表达载体，形成含有融合蛋白MX编码序列的表达载体；(c)将步骤(b)中含有融合蛋白MX编码序列的表达载体转入巴斯德毕赤酵母细胞；(d)筛选出MX编码序列整合入基因组的转化的巴斯德毕赤酵母细胞；(e)在适合编码MX融合蛋白的条件下，培养步骤(d)中转化的巴斯德毕赤酵母细胞；(f)分离出MX融合蛋白。
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