[发明专利]蛇毒神经生长因子的制法

摘要

本发明涉及的是用蛇毒制备神经生长因子的工艺方法，在大量实验基础上，优选眼镜蛇毒，在10℃以下条件下操作，经CM-SepnadexC50、CM-SphatoseFF、SepndexG75三步层析，制成半成品，加入稳定剂白蛋白和冻干制品的赋形剂右旋糖苷，过滤分装，冻干制得。

主权项

1、蛇毒神经生长因子的制法，其特征在于：所有操作均在10℃以下完成，①CM-SephadexC50层析取眼镜蛇毒10g，溶于0.01M乙酸钠缓冲液、PH5.8100ml中，溶解后，离心10000转，10分钟，取上清，对上述缓冲液5000ml透析，换3次缓冲液，然后样品上样于用0.01M乙酸盐缓冲液平衡好的层析柱5.5×100cm中，用0-0.7MNaCL线性梯度洗脱，收集具有神经生长因子活性的蛋白峰，浓缩冻干，②CM-SpharoseFF层析将上述浓缩的样品，溶于20ml0.01M乙酸钠缓冲液PH5.8中，上样于用0.01M乙酸钠缓冲液PH5.8平衡好的层析柱2.6×50cm中，用0-1MNaCL线性梯度洗脱，收集具有神经生长因子活性的蛋白峰，浓缩冻干，③SephdexG75层析将上述CM-SpharoseFF层析下的样品，溶解在10ml10.01M乙酸钠缓冲液，PH5.8内含0.15MNaCL中，离心10000转，取上清，上样于用0.01M乙酸钠缓冲液，PH5.8，内含0.15MNaCL平衡好后的SephdexG75柱中，收集含有NGF活性的对称峰，经电泳及高效液相色谱证明为单一峰后，透析除盐，冻干即得半成品。