[发明专利]重组人红细胞生成素制剂的制备生产方法无效
| 申请号: | 98100248.X | 申请日: | 1998-01-19 |
| 公开(公告)号: | CN1142281C | 公开(公告)日: | 2004-03-17 |
| 发明(设计)人: | 娄丹;徐莉萍;邹钟诚 | 申请(专利权)人: | 沈阳三生制药股份有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/79 | 分类号: | C12N15/79;C12N15/67;C12N1/00;C12P21/02;C07K14/505 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 110141辽宁省沈*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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| 摘要: | 本发明公开了一种大规模生产人红细胞生成素的制剂方法。该方法包括用添加了胰岛素和转铁蛋白的营养培养基,于特定培养条件下培养携带人促红细胞生成素DNA编码序列的被转化的哺乳动物细胞,以获得该蛋白质产物的高表达。然后对富含人红细胞生成素的收获液依次进行亲和层析、离子交换、反相高效液相及凝胶过滤纯化,以获得纯度高并具有高生物活性的人红细胞生成素。 | ||
| 搜索关键词: | 重组 红细胞 生成 制剂 制备 生产 方法 | ||
【主权项】:
1.一种表达人红细胞生成素的方法,包括对于含有编码人红细胞生成素的核苷酸序列的CHO细胞进行培养,其特征在于,先用含有胎牛血清的DMEM培养基将含有编码人红细胞生成素的核苷酸序列的CHO细胞接种液在细胞罐内扩增培养,再将培养基更换为无血清的合成培养基,连续灌流培养,所述无血清的合成培养基中含有胰岛素、转铁蛋白、糖及碳酸氢钠。
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