[发明专利]一种基于链置换反应的肿瘤标志物荧光共检测方法及其在胃癌诊断中的应用

摘要

本发明提供了一种基于链置换反应的肿瘤标志物荧光共检测方法及其在胃癌诊断中的应用，肿瘤标志物miRNA与mRNA的荧光探针，包括一组用于miR‑5585‑5p检测的双链探针P1T1，一组用于PLS3检测的双链探针P2T2，一组基于链置换反应用于放大荧光信号的双链探针A1A2。本发明在血清背景下检测miR‑5585‑5p的线性范围为1 fM‑10 nM，回归方程拟合如下：Y=221.3*X+770.3（R2=0.9782），计算最低检测限为1.19 fM。检测PLS3的线性范围为1 fM‑10 nM，回归方程拟合如下：Y=234.2*X+4169（R2=0.9717），计算最低检测限为16.37 fM。并且具有较高的检测特异性和准确度。基于该检测方法检测miR‑5585‑5p与PLS3所建立的胃癌诊断模型，诊断胃癌的曲线下面积（AUC）为0.884，标准误为0.044，95%置信区间为0.785‑0.948，诊断灵敏度为0.913，特异度为0.75，显著优于传统肿瘤标志物CA 72‑4。