[发明专利]一种新型重组Pfu DNA聚合酶在审
| 申请号： | 202310007700.2 | 申请日： | 2023-01-04 |
| 公开（公告）号： | CN116694595A | 公开（公告）日： | 2023-09-05 |
| 发明（设计）人： | 陈留涛;严源 | 申请（专利权）人： | 广州致佳生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/12 | 分类号： | C12N9/12;C12N15/54;C07K19/00;C12N15/62;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 510000 广东省广州市黄埔区方达*** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 暂无信息 | 说明书： | 暂无信息 |
| 摘要： | 本发明涉及生物工程技术领域，且公开了一种新型重组PfuDNA聚合酶，对激烈火球菌(PyrococcusfuriosusDSM3638)野生型PfuDNA聚合酶的关键结构域进行点突变，突变位点如下：Tyr209Gly,Gly211His,Pro217Phe,Arg243Gly,Tyr261Phe,Arg266Gly,Gln332Arg,Leu333Arg,Asp343Arg,Val344Arg,Pro369Phe,Glu374Asp,Glu375Asp,Glu376Asp,Tyr377Asp,Gln737Gly；其DNA聚合酶的蛋白质氨基酸序列，如proseq.1所示；以提高聚合酶的扩增效率；DNA聚合酶的基因序列，如DNAseq.1所示。本发明提高了重组酶的可溶性和热稳定性。提高了其在原核表达时的表达量，表达蛋白多以可溶性蛋白形式存在，可以提高纯化蛋白的得率，其表达效果如图2所示，其中上清组份中可溶性PfuDNA聚合酶蛋白表达量远高于沉淀组份，其热稳定效果和图5所示，重组PfuDNA聚合酶在37℃放置一周后，仍具有良好的扩增活性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 新型 重组 pfu dna 聚合 | ||
【主权项】：
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