[发明专利]死亡素和斑点叉尾鮰β-防御素基因重组毕赤酵母的构建方法及应用在审
| 申请号: | 202210665047.4 | 申请日: | 2022-06-14 |
| 公开(公告)号: | CN115433686A | 公开(公告)日: | 2022-12-06 |
| 发明(设计)人: | 金天明;何敬文;陈婷;赵微;扈立伟;任君 | 申请(专利权)人: | 天津市农业科学院 |
| 主分类号: | C12N1/19 | 分类号: | C12N1/19;C12N15/81;C12N15/12;A61K38/17;A61P31/04;C12R1/84 |
| 代理公司: | 天津市杰盈专利代理有限公司 12207 | 代理人: | 朱红星 |
| 地址: | 300192*** | 国省代码: | 天津;12 |
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| 摘要: | 本发明公开了死亡素和斑点叉尾鮰β‑防御素基因重组毕赤酵母的构建及抗菌活性研究。试验将死亡素和防御素经酵母偏好密码子优化后构建共表达TD基因至载体pPICZαA上,PCR、双酶切和测序筛选后经Sac I线性化,电转化至酵母表达菌株GS115中,Zeocin抗性、PCR筛选获得重组高抗阳性转化工程菌株GS115‑pPICZαA‑TD(Mut+),用0.5%甲醇诱导目的蛋白的表达,96 h后收集培养基上清冻干浓缩并纯化,进行体外抑菌试验、溶血性试验及细胞毒性试验。结果表明,本试验成功获得重组毕赤酵母且表达出广谱高效抑菌、安全性高的重组抗菌蛋白,为临床预防和治疗细菌性疾病提供治疗思路和实验依据。 | ||
| 搜索关键词: | 死亡 斑点 叉尾鮰 防御 基因 重组 酵母 构建 方法 应用 | ||
【主权项】:
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