[发明专利]一种基于滚环扩增反应检测肿瘤细胞的方法在审

专利信息
申请号: 202210252596.9 申请日: 2022-03-09
公开(公告)号: CN114509568A 公开(公告)日: 2022-05-17
发明(设计)人: 刘秋云;望芳鸣;黎刚 申请(专利权)人: 重庆医科大学
主分类号: G01N33/574 分类号: G01N33/574;C12Q1/682;C12N15/11
代理公司: 重庆信必达知识产权代理有限公司 50286 代理人: 陈小东
地址: 400010 重庆*** 国省代码: 重庆;50
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摘要: 发明公开了一种基于滚环扩增反应检测肿瘤细胞的方法,属于生化检测和分子诊断领域,其技术方案要点是,步骤如下:S1、选出特异性结合MUC1的适配体S2.2,并设计与适配体S2.2部分互补的核酸链CDNA;S2、使适配体S2.2和CDNA形成双链Ⅰ;S3、获得MCF‑7细胞样品;S4、向MCF‑7细胞样品中加入双链Ⅰ、锁式探针、T4DNA连接酶缓冲液和T4DNA连接酶,反应完成后灭活酶,获得反应产物Ⅱ;S5、向反应产物Ⅱ加入Phi 29DNA聚合酶、dNTPs、BSA和Phi 29DNA聚合酶缓冲液,反应结束后得到串联重复的G四链体单链;S6、在产物Ⅲ中加入荧光染料Tb3+。本发明主要用于将靶细胞的数量信号转化为滚环扩增反应扩增出的大量串联重复G四链体敏化的Tb3+信号,本方法灵敏度高。
搜索关键词: 一种 基于 扩增 反应 检测 肿瘤 细胞 方法
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