[发明专利]一种PPV检测的crRNA引物对、CRISPRCas12a系统及应用方法在审
| 申请号: | 202210000997.5 | 申请日: | 2022-01-04 |
| 公开(公告)号: | CN114277099A | 公开(公告)日: | 2022-04-05 |
| 发明(设计)人: | 宋祥军;涂健;李雅男;祁钊;邵颖;杨侃侃;刘红梅;姬凯元;朱良强;吴昊;王立;刘发全 | 申请(专利权)人: | 安徽农业大学;安徽省动物疫病预防与控制中心;安徽省兽药饲料监察所 |
| 主分类号: | C12Q1/6816 | 分类号: | C12Q1/6816;C12Q1/70;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司: | 安徽申策知识产权代理事务所(普通合伙) 34178 | 代理人: | 梁维尼 |
| 地址: | 230036 *** | 国省代码: | 安徽;34 |
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| 摘要: | 本发明涉及病毒检测技术领域,且公开了一种PPV检测的crRNA引物对、CRISPRCas12a系统及应用方法,包括以下步骤:S1、组织样品的处理:将称取约1g的各组织样品,加入1mL PBS后放入研磨钵中研磨成匀浆,转移至无菌离心管中,在离心机中以12000rpm/min离心3min;S2、病毒核酸的提取:使用某生化科技有限公司的病毒基因组DNA/RNA提取试剂盒对病毒进行核酸提取;S3、引物设计:在GenBank中检索猪细小病毒全基因组(GenBank ID:NC_001718.1),通过Meglign软件分析比对,确定猪细小病毒全基因组中高度保守片段为VP2基因,使用Primer Premier 5软件,设计VP2基因的全长引物,根据猪细小病毒全基因组中高度保守片段VP2基因,使用CRISPR‑DT网站中Cpf1引物设计软件设计猪细小病毒VP2基因的crRNA引物,并委托某生物公司合成生产。 | ||
| 搜索关键词: | 一种 ppv 检测 crrna 引物 crisprcas12a 系统 应用 方法 | ||
【主权项】:
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