[发明专利]一种制备飞蝗Lmzen纯合突变体的方法、RNP复合物及应用

摘要

本发明属于飞蝗生物技术和基因编辑技术领域，具体涉及一种制备飞蝗Lmzen纯合突变体的方法、RNP复合物及应用，一种制备飞蝗Lmzen纯合突变体的方法，其包括以下步骤：1)构建Lmzen基因敲除RNP复合物，其包括从5’端到3’端的以下可操作性连接的元件：T7启动子，Lmzen基因靶点和tracRNA‑crRNA所转录而成的RNA(sgRNA)；Cas9蛋白；ddH2O；2)将步骤1)所述的Lmzen基因敲除RNP复合物共转新鲜飞蝗卵，孵化，得G0代，将G0代与野生型杂交得G1代；3)将步骤2)所述G1代自交，获得的G2代，即为飞蝗Lmzen纯合突变体。本发明利用CRISPR/Cas9技术敲除飞蝗zen基因，提供了稳定有效的Lmzen纯合突变体品系。首次敲除飞蝗zen基因，成功实现了纯合突变体的构建，其后代具有大量死亡表型。