[发明专利]一种闪电克隆用反应混合试剂及其制备方法和应用在审

专利信息
申请号: 202111049566.X 申请日: 2021-09-08
公开(公告)号: CN113667649A 公开(公告)日: 2021-11-19
发明(设计)人: 刘立成;吴刚;闫广为;张治业 申请(专利权)人: 苏州博特龙免疫技术有限公司
主分类号: C12N9/00 分类号: C12N9/00;C12N15/52;C12N15/70;C12N15/66
代理公司: 北京中政联科专利代理事务所(普通合伙) 11489 代理人: 何磊
地址: 215000 江苏省苏州市漕湖*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明涉及分子克隆技术领域,具体是公开了一种闪电克隆用反应混合试剂及其制备方法和应用,一种闪电克隆用反应混合试剂,包括具有核酸外切功能的同源重组酶、DNA连接酶和反应缓冲液;以总体系为20uL计,同源重组酶的用量是0.06uL‑0.18uL,DNA连接酶的用量是0.03uL‑0.15uL/总反应体系,余量为反应缓冲液;所述反应缓冲液中各组分的质量百分比为:Tris‑HCl 10‑16%、MgCl218‑26%、K3P 5‑15%、KCl 3‑9%、NaCl 10‑18%、二硫苏糖醇8‑12%、甘油15‑30%。本发明克服了现有技术的不足,采用同源重组酶将外源基因克隆至载体靶位点,本反应混合试剂的准确率更高,更为简单,使用方便,更为快速,且具有更高的克隆效率和稳定性。
搜索关键词: 一种 闪电 克隆 反应 混合 试剂 及其 制备 方法 应用
【主权项】:
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