[发明专利]一种筛选LacZ基因标记山羊痘病毒的宿主细胞的方法在审

专利信息
申请号: 202110113418.3 申请日: 2021-01-27
公开(公告)号: CN112779293A 公开(公告)日: 2021-05-11
发明(设计)人: 杨柳;许国洋;余远迪;牟豪 申请(专利权)人: 重庆市畜牧科学院
主分类号: C12N15/863 分类号: C12N15/863;C12N15/64;C12N15/56;C12Q1/04;C12Q1/34;C12Q1/6888
代理公司: 北京元本知识产权代理事务所(普通合伙) 11308 代理人: 黎昌莉
地址: 402460 重庆*** 国省代码: 重庆;50
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摘要: 发明涉及生物技术领域,具体涉及一种筛选LacZ基因标记山羊痘病毒的宿主细胞的方法,包括检测细胞的培养;将检测细胞置于底层胶为LMA,顶层胶为X‑gal、LMA混合液的培养介质中进行培养,观察培养介质中胶色变化,选择胶色不变化的检测细胞作为所述LacZ标记基于山羊痘病毒的宿主细胞;提取检测细胞RNA进行RT‑PCR,对得到的PCR扩增产物测序,并将测序DNA与LacZ基因进行同源性分析鉴定。本发明方法不光适用于乳仓鼠肾细胞、羊肾细胞、羔羊睾丸原代细胞,作为LacZ基因标记重组病毒的宿主细胞都可使用该方法进行筛选,通过简单的变色观察即可筛选出适合LacZ标记重组病毒的宿主细胞,为后续便于挑蓝色病毒蚀斑纯化,排除细胞本身产生蓝斑对LacZ基因标记重组病毒蓝斑造成干扰。
搜索关键词: 一种 筛选 lacz 基因 标记 山羊 痘病毒 宿主 细胞 方法
【主权项】:
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