[发明专利]一种基于反向PCR技术检测CRISPR-Cas9位点特异性的方法在审
| 申请号： | 202011476470.7 | 申请日： | 2020-12-14 |
| 公开（公告）号： | CN112553311A | 公开（公告）日： | 2021-03-26 |
| 发明（设计）人： | 张贝贝;李苗;魏圆梦;周佳木;王娇娇;但汉东;王艳歌;史平玲;李晓丽;黄子旭;唐贺;宋宗明 | 申请（专利权）人： | 河南省人民医院 |
| 主分类号： | C12Q1/686 | 分类号： | C12Q1/686 |
| 代理公司： | 北京久维律师事务所 11582 | 代理人： | 邢江峰 |
| 地址： | 450000 *** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明提供一种基于反向PCR技术检测CRISPR‑Cas9位点特异性的方法。所述基于反向PCR技术检测CRISPR‑Cas9位点特异性的方法包括以下步骤：S1：sgRNA制备，首先将两条互补链退火并延伸，生成通用sgRNA框架模板，然后通过融合PCR，将20bp与目标DNA互补的特异性序列加入到通用sgRNA框架模板中，其次，通过融合PCR，将T7启动子序列加入上一步的扩增产物中，最后，通过体外转录合成sgRNAs。本发明提供的基于反向PCR技术检测CRISPR‑Cas9位点特异性的方法具有对DNA扩增速度快、灵敏度高、耗时少、容易推广的优点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 反向 pcr 技术 检测 crispr cas9 特异性 方法 | ||
【主权项】：
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