[发明专利]DC-CTL中断培养后细胞冻存复苏再培养方法

摘要

本发明公开了一种DC‑CTL中断培养后细胞冻存复苏再培养方法，包括以下步骤：S1.采集外周血，得到灭活血浆；S2.处理S1转移血浆层后余下的血细胞层，得到单个核细胞沉淀；S3.将S2得到的细胞沉淀用贴壁分离法得到DC细胞，悬浮细胞作CIK培养；S4.收获7D时的DC‑CTL细胞；S5.将DC‑CTL细胞离心得到细胞沉淀，上清培养液保存待用；S6.将S5得到的细胞沉淀冻存；S7.将S5中的上清培养液解冻；取出S6中冻存的细胞并快速解冻，混匀后离心得到细胞沉淀；S8.将S7得到的细胞沉淀，并使用解冻后的上清培养液重悬，细胞悬液的终细胞浓度为1‑2百万活细胞/ml；S9.将S8的细胞悬液转移至培养箱中继续培养，收集DC‑CTL细胞，并取样做检测。