[发明专利]快速构建鸭坦布苏病毒反向遗传株的方法在审
| 申请号： | 202010426547.3 | 申请日： | 2020-05-19 |
| 公开（公告）号： | CN111676198A | 公开（公告）日： | 2020-09-18 |
| 发明（设计）人： | 胡峰;李玉峰;于可响;郭效珍;刘存霞;刘丽萍;马秀丽;黄兵;高月花;王胜;宋敏训;吴家强;褚新星 | 申请（专利权）人： | 山东省农业科学院家禽研究所（山东省无特定病原鸡研究中心）;山东和康源生物育种股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N7/01 | 分类号： | C12N7/01;C12N15/90;C12N5/10 |
| 代理公司： | 北京国坤专利代理事务所(普通合伙) 11491 | 代理人： | 赵红霞 |
| 地址： | 250023 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种快速构建鸭坦布苏病毒反向遗传株的方法：(1)将鸭坦布苏病毒亲本病毒株全基因组分为三个片段进行PCR扩增，在第一个片段的5'端添加巨细胞病毒早期启动子序列，在第三个片段的3'端添加丁型肝炎病毒核酶序列和猿猴病毒40多腺苷酸化信号序列；纯化，构成鸭坦布苏病毒感染性亚基因组复制子；(2)转染鸭胚成纤维细胞，在细胞内自发进行同源重组，并转录形成具有感染性的完整病毒转录本，继而包装出成熟的病毒粒子，获得反向遗传株病毒。本发明获得的含有遗传标记的拯救病毒在DEF细胞上的增殖能力和病毒滴度与亲本病毒相似，且遗传稳定性良好。本发明为研究该病毒的基因功能、致病机理、新型疫苗开发等提供了有利的工具。 | ||
| 搜索关键词： | 快速 构建 鸭坦布苏 病毒 反向 遗传 方法 | ||
【主权项】：
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