[发明专利]一种维生素D3羟化酶转化生产25-羟基维生素D3的方法在审
| 申请号： | 202010328405.3 | 申请日： | 2020-04-23 |
| 公开（公告）号： | CN111440779A | 公开（公告）日： | 2020-07-24 |
| 发明（设计）人： | 刘婷婷 | 申请（专利权）人： | 沈阳美得欣医药科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/02 | 分类号： | C12N9/02;C12P33/06;C12R1/19;C12R1/04 |
| 代理公司： | 北京久维律师事务所 11582 | 代理人： | 邢江峰 |
| 地址： | 110000 辽宁省*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 一种维生素D3羟化酶转化生产25‑羟基维生素D3的方法，该方法按如下步骤进行：a.发酵：将产维生素D3羟化酶的基因工程菌接入发酵培养基，培养至OD600＝1‑5时加入IPTG进行诱导产酶，其中IPTG的终浓度为1.2‑2mM，诱导温度为28℃，发酵培养16‑24h得发酵液；b.破壁：发酵液通过11000‑13000rpm离心5‑7min，收集菌体，并加入发酵液体积4‑6倍的去离子水洗菌体1‑3次，用磷酸与硝酸1.5:1混合缓冲液重悬菌体，菌液通过高压均质机进行机械破壁，获得细胞破壁液；等步骤从流程上缩短转化周期，在短时间内直接引入羟基生成活性产物，该转化条件温和。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 维生素 d3 羟化酶 转化 生产 25 羟基 方法 | ||
【主权项】：
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