[发明专利]一种特异肽段质谱分析样本的制备方法在审
| 申请号: | 201911246411.8 | 申请日: | 2019-12-09 |
| 公开(公告)号: | CN110850102A | 公开(公告)日: | 2020-02-28 |
| 发明(设计)人: | 徐耀瑜;马军岩;司伟杰;吴汉夔 | 申请(专利权)人: | 安阳师范学院 |
| 主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/531;C12P21/06 |
| 代理公司: | 安阳金泰专利代理事务所(普通合伙) 41150 | 代理人: | 王晖 |
| 地址: | 455000 河南省安*** | 国省代码: | 河南;41 |
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| 摘要: | 一种特异肽段质谱分析样本的制备方法,包括以下步骤:A:取所要分析的样本细胞,收集生物素培养环境的200万以上细胞数,溶于细胞裂解缓冲液中,超声裂解,定量蛋白质溶液浓度后进行肽段的胰蛋白酶消化;B:胰蛋白酶方法消化肽段;消化后进行‑80℃冻干;C:预备Protein G珠子结合的生物素抗体;D:1 ml捕获缓冲液溶解得到的冻干肽段;E:合并C、D中的抗体和肽段,4℃孵育2小时,洗脱缓冲液洗脱4次;F:总上清液经3M C18固相萃取膜片装填200µl枪头制备的微过滤柱洗脱除盐后溶解肽段,进行质谱检测。本发明可以精确的查看细胞内天然生物素化蛋白质。 | ||
| 搜索关键词: | 一种 特异 肽段质 谱分析 样本 制备 方法 | ||
【主权项】:
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