[发明专利]基于Cas12a/gRNA的快速鉴定分枝杆菌的方法

摘要

本发明公开了一种基于Cas12a/gRNA的快速鉴定分枝杆菌的方法，包括以下步骤：S1:进行菌种的培养；S2:gRNA探针的设计与制备；S3:DNA制备与PCR扩增；S4：采用FnCas12a/gRNA进行切割，进行荧光检测，从而区分出分枝杆菌。本申请基于Cas12a/gRNA的平台来鉴定MTB和大多数NTM物种。通过设计针对rpoB序列的物种特异性gRNA探针，基于Cas12a/gRNA的平台成功地鉴定了MTB和六种主要NTM物种无交叉反应。采用盲法，73株临床分离的分枝杆菌中有72株被正确鉴定，与以往rpoB测序结果一致。这些结果表明，基于Cas12a/gNRA的平台是快速、准确和经济有效地鉴定MTB和NTM物种的一个有希望的工具。