[发明专利]一种用于检测人脐带间充质干细胞表面分子标记方法和试剂盒在审
| 申请号： | 201911230423.1 | 申请日： | 2019-12-04 |
| 公开（公告）号： | CN110760572A | 公开（公告）日： | 2020-02-07 |
| 发明（设计）人： | 薛松磊;沈晖;崔恒宓 | 申请（专利权）人： | 江苏易诺维生物医学研究院有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6851 | 分类号： | C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 211100 江苏省南京市江宁区苏源大道1*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于检测人脐带间充质干细胞表面分子标记方法和试剂盒，包括以下步骤：1)收集、分离培养人脐带间充质干细胞；2)将上述人脐带间充质细胞培养至对数生长期，使用重组胰酶消化2‑3min后收集至EP管中；3)使用试剂盒提供总RNA，合成cDNA；4)根据CD105、CD90、CD73、CD19、CD34、CD45、CD116和HLA‑DR的基因设计引物序列，并以上述cDNA为模板进行PCR扩增；5)通过全自动核酸分析系统对步骤4)得到的PCR产物进行定性定量检测。本发明选用三种阳性表面分子标记CD105、CD90、CD73和五种阴性表面分子标记CD19、CD34、CD45、CD116、HLA‑DR来快速检测人间充质干细胞的表面分子标记，从而确定培养的干细胞的质量。 | ||
| 搜索关键词： | 表面分子 人脐带间充质干细胞 试剂盒 人间充质干细胞 核酸分析系统 基因设计引物 对数生长期 间充质细胞 定量检测 分离培养 快速检测 胰酶消化 干细胞 人脐带 总RNA 阴性 定性 合成 检测 | ||
【主权项】：
1.一种用于检测人脐带间充质干细胞表面分子标记方法，其特征在于：包括以下步骤：/n1)收集、分离培养人脐带间充质干细胞；/n2)将上述人脐带间充质干细胞培养至对数生长期，使用重组胰酶消化2-3min后收集至EP管中；/n3)使用试剂盒提供总RNA，合成cDNA；/n4)根据CD105、CD90、CD73、CD19、CD34、CD45、CD116和HLA-DR的基因设计引物序列，并以上述cDNA为模板进行PCR扩增；/n5)通过全自动核酸分析系统对步骤4)得到的PCR产物进行定性定量检测。/n
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