[发明专利]一种辣椒苗期疫病抗性的浸根接种鉴定方法

摘要

本发明属于园艺作物抗病性鉴定技术领域，具体涉及一种辣椒疫病抗性浸根接种鉴定方法。本发明包括辣椒苗准备、孢子悬浮液制备、接种、病情调查与评价等步骤，即在苗龄为5～6真叶期时，采用浓度为10个游动孢子/mL的孢子悬浮液浸泡辣椒苗的裸露根部和茎基部，接种后第5 d调查病情指数，以病情指数进行分级，评价品种的抗感特性。本发明利用浸根接种法进行抗性鉴定，其优势在于接菌浓度低，解决了大量培养菌的耗时耗力问题，病菌与根部接触，符合自然发病情况，病情指数分级标准科学，接种环境要求低，易掌握，为大规模辣椒抗病育种材料的筛选提供技术支持。

主权项

1.一种辣椒苗期疫病抗性的浸根接种鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：/n（1）辣椒苗准备：选取饱满的辣椒种子消毒催芽处理，然后单粒点播在盛有育苗基质的穴盘内，选取健康完整的辣椒苗用于接种；/n（2）孢子悬浮液制备：将辣椒疫霉菌菌种接种在燕麦固体培养基上进行培养，在25 ℃下恒温暗培养7 d，然后在28 ℃光照/25 ℃暗交替培养7 d，诱导产生孢子囊，用无菌水冲洗菌体，在4 ℃放置30 min获得孢子悬浮液，通过无菌水稀释，配制成一定浓度的孢子悬浮液，即可用于接种；/n（3）接种：步骤（1）的辣椒苗生长到一定时期后，用无菌水冲洗干净根部，除去育苗基质，然后用吸水纸拭去表面的水分。50 ml锥形瓶内加入孢子悬浮液30 ml，每个锥形瓶内插入6棵苗，孢子悬浮液浸泡辣椒苗的根部和茎基部。接种后将植株置于温度28 ℃光照16 h，25 ℃黑暗8 h的植物培养箱内，在侵染期间锥形瓶内水缺少时，补充无菌水；/n（4）病情调查与评价：接种后，待出现辣椒疫病发病症状后，选择适宜时间调查每株苗发病情况，按幼苗病情级别进行病情指数调查，进行抗性评价。/n苗期辣椒疫病分级标准如下：0级—无症状；1级—幼苗根茎部轻微水浸状病斑，叶片不萎蔫或可恢复性萎蔫；2级—幼苗根茎部水浸状病斑2 cm-3 cm，叶片不可恢复性萎蔫，下部叶片偶有脱落；3级—幼苗根茎部水浸状病斑超过3 cm，叶片明显萎蔫或落叶明显；4级—幼苗根茎部水浸状病斑大面积蔓延，除生长点外全部落叶或植株萎蔫；5级—植株枯死。/n病情指数＝ ∑（各级病株数×相对级值）/（ 调查总株数×最高级值）×100/n辣椒疫病抗性评价标准：免疫（I）病情指数=0；高抗（HR）0<病情指数≦10；抗病（R）10<病情指数≦30；中抗（MR）30<病情指数≦50；感病（S）50<病情指数≦70；高感（HS）病情指数>70。/n