[发明专利]一种表达eGFP的同源重组载体、重组细胞及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201910886881.4 | 申请日： | 2019-09-19 |
| 公开（公告）号： | CN110564765B | 公开（公告）日： | 2021-06-01 |
| 发明（设计）人： | 常艳燕;常惠芸;邵军军;李扬帆;张永光 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/66;C12N5/10;C12N15/90;C12N9/22 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 董大媛 |
| 地址： | 730046 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种表达eGFP的同源重组载体，属于基因组编辑技术领域，所述表达eGFP的同源重组载体包括载体骨架和插入片段，所述插入片段包括左同源臂、CMV启动子、eGFP表达框和右同源臂；所述左同源臂的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；所述右同源臂的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明中所述同源重组载体与CRISPR/Cas9打靶载体共转染非洲绿猴胚胎肾上皮细胞后，通过G418筛选，得到定点整合eGFP并稳定表达eGFP的非洲绿猴胚胎肾上皮细胞。本发明所述的细胞构建方法支持外源基因的定点整合和稳定表达。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 表达 egfp 同源 重组 载体 细胞 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种表达eGFP的同源重组载体，包括载体骨架和插入片段，其特征在于，所述插入片段包括左同源臂、CMV启动子、eGFP表达框和右同源臂；/n所述左同源臂的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；所述右同源臂的核苷酸序列如SEQID No.2所示。/n
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