[发明专利]一种基于铜纳米簇-共振能量转移体系构建的免疫传感器的制备方法

摘要

一种基于铜纳米簇‑共振能量转移体系构建的免疫传感器的制备方法及应用，该发明属于纳米材料与共振能量转移FRET领域；本发明以牛血清蛋白BSA包裹的铜纳米团簇Cu NCs作为能量供体，并在其表面利用L‑抗坏血酸原位生长金纳米粒子Au NPs作为能量受体，得到Cu NCs‑Au NPs三维共振结构，供受体对之间通过偶极‑偶极的非辐射作用方式传递能量，其传递速率与距离的六次方呈反比，二者之间光谱的高比率重叠以及超近的配对距离，显著猝灭了Cu NCs的ECL发射并控制发光强度在合理范围内，为生物标志物的痕量检测提供了一种新的ECL‑FRET能量转移新模型，为猝灭型ECL传感体系的机理探究提供了一种全新的思路。

主权项

1.一种基于铜纳米簇-共振能量转移体系构建的免疫传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1) 将玻碳电极分别在乙醇和去离子水中超声清洗30 s，依次用1.0 μm, 0.3 μm和0.05 μm的Al₂O₃抛光粉对其抛光使之类似镜面般光滑，用氮气吹干；/n(2) 将6 μL分散均匀、浓度为1 ~ 3 mg/mL的Cu NCs-Au NPs溶液滴涂至玻碳电极表面，室温下自然晾干；/n(3) 将上述晾干的玻碳电极插入5 ~ 10 μg/mL的重组蛋白A溶液中，于4 ^oC下孵化30min，超纯水洗净，室温下自然晾干；/n(4) 滴加6 μL 质量分数为0.1%的牛血清蛋白溶液，使之封闭非特异性活性位点，用pH7.4的磷酸盐缓冲溶液冲洗电极表面，室温下自然晾干；/n(5) 滴加6 μL浓度为1 ~ 2 μg/mL的抗体标准溶液，于4 ^oC下孵化1 h，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液冲洗电极表面，4 ^oC晾干；/n(6) 滴加6 μL未知浓度的对应于抗体的抗原溶液，于4 ^oC下孵化1 h，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液冲洗电极表面，4 ^oC晾干，传感器构建完毕。/n