[发明专利]人体液中抗AMPA1自身抗体的检测材料、制备方法及应用有效
| 申请号： | 201910738476.8 | 申请日： | 2019-08-12 |
| 公开（公告）号： | CN110606885B | 公开（公告）日： | 2021-03-23 |
| 发明（设计）人： | 闫亚平;李怡婷;李科 | 申请（专利权）人： | 陕西脉元生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/705 | 分类号： | C07K14/705;C07K1/14;C12N15/867;G01N33/531;G01N33/564 |
| 代理公司： | 西安恒泰知识产权代理事务所 61216 | 代理人： | 李婷;金艳婷 |
| 地址： | 710003 陕西省西安*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明公开了人体液中抗AMPA1自身抗体的检测材料、制备方法及应用，本发明将AMPA1抗原包被于NC膜上制成抗AMPA1受体检测材料，人血清和脑脊液中的特异性AMPA1抗体会与抗原结合，利用碱性磷酸酶底物‑配体反应进行显色，并在显色反应中加入本发明的封闭材料，可用通过肉眼观察直接判断检测样品中是否含有AMPA1抗体。该方法具有灵敏度高，操作简便，快速检测等优点，有助于抗AMPA1受体脑炎的识别和诊断。 | ||
| 搜索关键词： | 人体 液中抗 ampa1 自身抗体 检测 材料 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.人体液中抗AMPA1自身抗体的检测材料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/n步骤1，获取AMPA1的CDS序列作为目的基因，将带有酶切位点的目的基因插入17T2A质粒载体中，得到重组质粒载体17T2A-AMPA1；/n其中，17T2A质粒载体包括含AmpR序列、原核复制子pUC Ori序列、病毒复制子SV40 Ori序列、RSV启动子、慢病毒5’LTR、慢病毒3’LTR、Gag顺式元件、RRE顺式元件、env顺式元件、cPPT顺式元件、eWPRE增强型土拨鼠乙肝病毒转录后调控元件、CMV启动子、MCS多克隆位点以及T2A元件；/n步骤2，将重组质粒载体17T2A-AMPA1转染入293T细胞中，得到17T2A-AMPA1-293T细胞；/n步骤3，裂解17T2A-AMPA1-293T细胞，去除17T2A-AMPA1-293T细胞的核蛋白、DNA和胞浆蛋白，再加入复合提取液，室温静置15～20min；/n其中，复合提取液由CaMgBuffer、NP40和葡萄糖混合而成，CaMgBuffer由CaCl
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