[发明专利]一种用于肿瘤术后放疗光热-光动力联合治疗的控释水凝胶的制备方法

摘要

本发明涉及生物医用高分子材料领域，公开了一种用于肿瘤术后放疗光热‑光动力联合治疗的控释水凝胶的制备方法，本发明利用具有良好生物相容性的丝素蛋白负载具有良好光热性能和放疗功能的硫化铜@黑色素‑PEG@多巴胺纳米粒子和光敏剂5‑氨基乙酰丙酸，得到了一种用于肿瘤术后放疗联合光热、光动力治疗的具有控释功能水凝胶。它能对术后肿瘤部位进行光热治疗、光动力治疗和放射治疗。同时该水凝胶具有良好的控释性能，可以起到减少给药剂量，减轻或避免毒副反应的作用。提高药物的稳定性，便于贮存；可以建立一些新的给药途径。

主权项

1.一种用于肿瘤术后放疗光热‑光动力联合治疗的控释水凝胶的制备方法，其特征在于：以μg、mg、g、μL和mL计，包括以下步骤：1)取0.8‑1.2g蚕丝，用0.4‑0.6wt％的Na₂CO₃溶液在浴比1∶90‑110下于90‑100℃水浴中对蚕丝进行至少一次脱胶处理，每次30‑40min；2)配制400‑600mL 9.3M的溴化锂溶液，在浴比1∶40‑60下于55‑65℃水浴中对蚕丝进行溶解，时间为3‑4h；3)将步骤2)所得溶液于去离子水中透析2‑3d；4)将步骤3)所得溶液于PBS溶液中继续透析1‑2d；5)将步骤4)所得溶液进行浓缩，得到4‑8wt％的丝素蛋白溶液；6)取0.40.6g黑色素溶于8‑12mL去离子水中得到黑色素水溶液，再取1‑1.5g CuCl₂·2H₂O和300‑350mg聚乙烯吡咯烷酮溶于100‑150mL去离子水中，然后合并两种溶液，搅拌2‑3h，加入150‑200mg Na₂S·9H₂O；然后置于水浴中加热至85‑90℃，搅拌15‑20min，得到深绿色硫化铜纳米悬浮液；然后在去离子水中透析3‑4d，离心取沉淀，55‑65℃真空干燥过夜，得到硫化铜@黑色素纳米粒；7)取0.5‑0.8g步骤6)所得硫化铜@黑色素粒子分散于0.5‑0.8mL水溶液中，超声25‑35min分散均匀，将其滴加至18‑22mg/mL PEG5000‑NH₂水溶液中，剧烈搅拌10‑14h，用去离子水洗涤多次，除去未反应的PEG5000‑NH₂，冻干法除去水，得到硫化铜@黑色素‑PEG纳米粒子；8)取0.4‑0.6g步骤7)所得硫化铜@黑色素‑PEG纳米粒子分散于100‑120mL Tirs缓冲液中，加入0.4‑0.6g多巴胺，于室温搅拌12‑14h，用去离子水洗涤多次，冻干法除去水，得到硫化铜@黑色素‑PEG@聚多巴胺纳米粒子；9)取0.8‑1.2mg 5‑氨基乙酰丙酸溶于0.8‑1.2mL PBS缓冲液中；10)取0.6‑1.0mL步骤5)所得丝素蛋白溶液，再取100‑200μg步骤8)所得硫化铜@黑色素‑PEG@聚多巴胺纳米粒和100‑200μL步骤9)所得5‑氨基乙酰丙酸溶液加入到丝素蛋白溶液，于35‑39℃下搅拌2‑3h，加入10‑20μL 1000U/mL的辣根过氧化物酶水溶液，混合均匀后加入10‑20μL 0.4‑0.6％的过氧化氢溶液，混合均匀后用移液枪转移至PTFE模具中，于35‑39℃环境下放置3‑4h成型；11)将步骤10)中成型后的负载有5‑氨基乙酰丙酸和硫化铜@黑色素‑PEG@聚多巴胺纳米粒子的丝素蛋白水凝胶脱模，得到用于肿瘤术后放疗光热‑光动力联合治疗的控释水凝胶。