[发明专利]多元核酸检测方法及试剂盒在审
| 申请号： | 201910598726.2 | 申请日： | 2019-07-04 |
| 公开（公告）号： | CN110305937A | 公开（公告）日： | 2019-10-08 |
| 发明（设计）人： | 孙清江;王琎;屈晓君;刘玉乾 | 申请（专利权）人： | 东南大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6834 | 分类号： | C12Q1/6834 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 王艳丽 |
| 地址： | 210018 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种多元核酸检测方法及试剂盒，方法包括：设计DNA轨道和DNA步行者，将不同的DNA轨道偶联到不同的荧光编码微球上；以DNA步行者为模板、DNA轨道为引物进行DNA行走反应，其中样本所含的靶标核酸能够触发荧光编码微球表面DNA行走；对荧光编码微球表面DNA行走产物进行荧光标记；使用流式细胞仪对荧光编码微球进行荧光检测，获得样本中靶标核酸的含量。本发明还公开了一种多元核酸检测试剂盒。本发明将DNA行走和荧光编码微球相结合，实现核酸快速、高灵敏和多元检测，为检测核酸如miRNA提供了新方法。 | ||
| 搜索关键词： | 荧光编码微球 靶标核酸 核酸检测 表面DNA 试剂盒 核酸 轨道 样本 核酸检测试剂盒 步行 流式细胞仪 多元检测 荧光标记 荧光检测 触发 偶联 引物 灵敏 检测 | ||
【主权项】：
1.一种用于非疾病诊断目的的多元核酸检测方法，其特征在于，包括：(1)设计DNA轨道，将不同的DNA轨道偶联到不同的荧光编码微球上，所述DNA轨道与对应的DNA步行者特异性杂交，不同的荧光编码微球具有不同的可识别荧光信号；针对不同靶标核酸，设计与对应靶标序列特异性杂交的DNA步行者，所述DNA步行者的核酸二级结构为茎环结构，包括用于与靶标核酸互补杂交打开茎环结构的靶标识别区以及与对应DNA轨道杂交的DNA轨道识别区；(2)以DNA步行者为模板、DNA轨道为引物进行DNA行走反应，待检测样本所含的靶标核酸能够触发荧光编码微球表面DNA行走；(3)对荧光编码微球表面DNA行走产物进行荧光标记，该荧光标记与微球本身的荧光编码相区别；(4)使用流式细胞仪对荧光编码微球进行荧光检测，获得样本中靶标核酸的含量。
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