[发明专利]一种糜子幼叶离体培养及植株再生的方法

摘要

本发明公开一种糜子幼叶离体培养及植株再生的方法，包括以下步骤：（1）外植体的获取：将种子消毒后，接种至1/2 MS培养基表面，在25±1℃下暗培养2 d，待种子发芽后，在30℃±1℃下光培养5 d，得到无菌幼苗；在超净工作台上，取无菌幼苗的基部2 cm的部分，除去外层的茎壳，然后切成0.8‑1.0 cm的小段，得到外植体；（2）愈伤组织的诱导；（3）愈伤组织的分化；（4）诱导生根及植株移栽。本发明可以通过外植体幼叶离体培养出得到完整的糜子植株，避免了传统种植方式的单一化，对糜子品种改良、良种繁育、快速繁殖、脱毒苗生产、种质创新、糜子转基因技术等方面的研究具有重要意义。

主权项

1.一种糜子幼叶离体培养及植株再生的方法，包括以下步骤：（1）外植体的获取：将种子消毒后，接种至1/2 MS培养基表面，在25±1℃下暗培养2 d，待种子发芽后，在30℃±1℃下光培养5 d，得到无菌幼苗；在超净工作台上，取无菌幼苗的基部2 cm的部分，除去外层的茎壳，然后切成0.8‑1.0 cm的小段，得到外植体；（2）愈伤组织的诱导：将外植体水平平铺接种在诱导培养基上，在25℃±1℃下暗培养3 w，得到愈伤组织；（3）愈伤组织的分化：将得到的愈伤组织接种在第一分化培养基上，光培养10 d；然后转移至第二分化培养基上进行光培养，至分化出的幼芽长至3 cm得到幼苗；其中，第一分化培养基为：MS+ TDZ 0.5mg/L +蔗糖30g/L+琼脂7g/L，pH为5.8‑6.0；第二分化培养基为：MS+ 6‑BA 1.0 mg/L +IAA 0.5 mg/L + GA₃ 0.1 mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L，pH为5.8‑6.0；（4）诱导生根及植株移栽：将幼苗转移至生根培养基中密封培养，待幼苗生根30 d后，敞开瓶口炼苗3 d，然后用蒸馏水清洗根部，移入盛有基质的花盆中，在湿度60.0%的条件下散光培养，待幼苗长出1‑2片新叶，进行移栽。