[发明专利]南方地区甜樱桃与中国樱桃种间杂交胚挽救成苗方法

摘要

本发明涉及植物杂交育种领域，尤其涉及一种南方地区适栽甜樱桃与中国樱桃种间杂交胚挽救成苗方法。该方法结合欧洲甜樱桃和中国樱桃的优点，以‘欧洲甜樱桃’为母本，‘中国樱桃’为父本进行了种间远缘杂交。针对远缘杂交胚败育的问题，对杂交胚进行了胚挽救。确定了各杂交组合胚挽救适宜取材时期，杂种幼胚萌发、继代扩繁、生根培养各自所需外源生长调节剂的浓度和比例以及适宜炼苗移栽方法。应用该技术建立的南方地区甜樱桃与中国樱桃种间胚挽救体系，胚萌发率达到80.00%，继代培养杂种新梢增殖系数达到了5.0，生根培养生根率90.91%，胚培苗长势好，生长健壮，叶色绿，炼苗移栽成活率达到77.27%。

主权项

1.南方地区甜樱桃与中国樱桃种间杂交胚挽救成苗方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：1）收集花粉及授粉：以中国樱桃（Prunus. pseudocerasus L.）为父本，采集铃铛花期的自然花；在室内剥下花药，20 ~ 30 ℃干燥的条件下阴干；待花药开裂散粉后，采集于小玻璃瓶中并密封置于1 ~ 6 ℃的冰箱中保存备用；以欧洲甜樱桃（Prunus. avium L.）为母本，铃铛期花朵进行人工不去雄授粉；授粉后立即套硫酸纸袋并5 ~ 10 d后换网袋；2）采果及低温层积处理：分别采摘母本处于硬核期PF > 0.5（胚长/种长）的杂交幼果，采果后鲜果放入透明塑料保鲜盒，置1 ~ 6 ℃低温冰箱内贮存30 ~ 40 d；3）幼胚接种及萌发培养：低温处理结束后，冲洗干净果实，剥去果肉取胚；在超净工作台中进行消毒；剥去内种皮接种于含有第一外源生长促进添加剂的1/2MS固体培养基上，置于培养室培养；4）继代扩繁培养：取萌发的幼胚无菌新梢，截取1.5 ~ 2.5 cm长的茎段接种于继代培养基MS上，继代培养基MS加入第二外源生长促进添加剂；置于培养室培养35 ~ 45 d；5）生根培养：杂种苗继代培养后，将株高2 cm以上生长健壮的丛生芽新梢接种于附加第三外源生长促进添加剂生根培养基1/2MS中；置于培养室培养35 ~ 45 d，得到杂种幼苗；6）炼苗移栽：将杂种幼苗炼苗10 ~ 20 d，移栽入营养钵；移栽时间为2月中旬。