[发明专利]一种快速筛选烟草种子转基因阳性株的方法在审
| 申请号： | 201910366547.6 | 申请日： | 2019-04-30 |
| 公开（公告）号： | CN110093441A | 公开（公告）日： | 2019-08-06 |
| 发明（设计）人： | 解敏敏;龚达平 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院烟草研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 266101 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种快速筛选烟草转基因阳性株的方法，技术要点如下：成熟的转基因烟草收种时，直接剪下果荚采收，保护果荚不被破坏，在超净工作台内，将果荚撕开直接将种子均匀播撒至培养基上；培养基组分为：Murashige and Skoog(MS)2.215g/L+琼脂8g/L+潮霉素18mg/L，pH值为5.8；培养至2周，观察烟草苗的生长高度，此时的幼苗长势会出现高、低等差异，选择生长较快、植株高、有真叶的苗进行假植移栽。并进行后续PCR阳性鉴定，该方法阳性筛选率达91％。本发明的优点是成本低、操作简单、快速高效。其他抗性标记进行筛选也可借鉴该方法。 | ||
| 搜索关键词： | 果荚 快速筛选 培养基 超净工作台 烟草转基因 转基因烟草 技术要点 假植移栽 抗性标记 选择生长 烟草种子 阳性筛选 幼苗长势 植株 潮霉素 烟草苗 转基因 采收 剪下 琼脂 收种 真叶 播撒 筛选 生长 观察 成熟 | ||
【主权项】：
1.一种筛选烟草种子转基因阳性株的方法，其特征在于，所述的方法包括如下的步骤：1)对待检测的成熟的烟草，直接剪下果荚采收，将果荚撕开直接将将待检测的种子均播撒至培养基上进行萌发，其中使用的培养基组分如下：Murashige and Skoog 2.215g/L、琼脂8g/L、潮霉素18mg/L，pH值为5.8；2)在组织培养室培养至2周，确定生长快、植株高、有真叶的苗为转基因阳性株。
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