[发明专利]一种猪病毒性腹泻多重RT-PCR检测方法在审
| 申请号： | 201910335597.8 | 申请日： | 2019-04-24 |
| 公开（公告）号： | CN109880937A | 公开（公告）日： | 2019-06-14 |
| 发明（设计）人： | 杨鑫;王红宁;陈丹钰;张兰;田益明 | 申请（专利权）人： | 四川大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12R1/93 |
| 代理公司： | 成都顶峰专利事务所(普通合伙) 51224 | 代理人： | 王霞 |
| 地址： | 610000 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种猪病毒性腹泻多重RT‑PCR检测方法，涉及养猪疾病诊断技术领域，包括如下步骤：1)收集粪便样品，提取PEDV、TGEV、PoRVA、PKV、PAstV以及PDCoV共六种病毒的RNA且完成每一种RNA的反转录；2)设计步骤1)中六种病毒各自的引物组；3)制备步骤1)中六种病毒阳性质粒，具体包括如下步骤；a)回收目的基因片段；b)目的基因与载体pClone007的连接，得到连接产物；c)连接产物的转化，得到重组质粒；d)提取目标重组质粒；4)建立多重PCR扩增反应体系；具有特异性好，检测灵敏度高以及检测效果高的优点。 | ||
| 搜索关键词： | 病毒性腹泻 连接产物 目的基因 病毒 种猪 多重PCR扩增 多重RT-PCR 检测灵敏度 粪便样品 疾病诊断 目标重组 阳性质粒 重组质粒 反转录 引物组 检测 养猪 质粒 制备 回收 转化 | ||
【主权项】：
1.一种猪病毒性腹泻多重RT‑PCR检测方法，其特征在于，包括如下步骤：1)收集粪便样品，提取PEDV、TGEV、PoRVA、PKV、PAstV以及PDCoV共六种病毒的RNA且完成每一种RNA的反转录；2)设计步骤1)中六种病毒各自的引物组；3)制备步骤1)中六种病毒阳性质粒，具体包括如下步骤；a)回收目的基因片段；b)目的基因与载体pClone007的连接，得到连接产物；c)连接产物的转化，得到重组质粒；d)提取目标重组质粒；4)建立多重PCR扩增反应体系。
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