[发明专利]一种肠道原生菌基因改造的方法

摘要

本发明提供一种肠道原生菌基因改造的方法。利用合成生物学的方法将筛选出的肠道原生大肠杆菌基因改造后进行微囊化处理。以原生大肠杆菌分泌单一功能性生物活性分子——粘性蛋白(Ag43)为例，研究其在炎症性肠病(IBD)治疗方法的应用。为研究肠道微生物与机体互作提供了一种新思路。将生物安全的合成生物学技术与无创伤式光遗传技术相结合应用于肠道疾病的治疗，相对于传统的肠道疾病治疗的方法而言具有诸多优势：筛选肠道原生大肠杆菌进行基因改造，提高了后期微囊化原生菌肠道定植的生物顺应性。将合成生物学技术与光遗传技术相结合，实现了对治疗肠道疾病的生物活性分子在时空上的精确调控。

主权项

1.一种肠道原生菌基因改造的方法，其特征在于：利用合成生物学的方法将筛选出的肠道原生大肠杆菌基因改造后进行微囊化处理,主要步骤如下：1)C57BL/6小鼠肠道原生大肠杆菌的筛选；2)利用合成生物学的手段对原生大肠杆菌进行基因改造(1)利用合成生物学的手段合成质粒系统：pDawn‑GFP‑Ag43，其中pDawn是蓝光响应启动子，在接收到蓝光信号后，会启动下游基因GFP‑Ag43的转录；(2)利用化学诱导‑CaCl₂法将筛选出的原生大肠杆菌诱导成感受态；(3)进行质粒转化，将光控质粒系统转化到原生大肠杆菌感受态内,通过观察荧光标签的表达来证明功能分子Ag43的表达；3)将改造后的原生菌进行微囊化处理。