[发明专利]一种植物基因启动子BSP片段的高效扩增方法在审
| 申请号： | 201910181512.5 | 申请日： | 2019-03-11 |
| 公开（公告）号： | CN109706220A | 公开（公告）日： | 2019-05-03 |
| 发明（设计）人： | 薛涛;晁秋杰;段永波;朱艳芳;藤井通;薛建平;盛玮;张爱民 | 申请（专利权）人： | 淮北师范大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6806 | 分类号： | C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙) 61223 | 代理人： | 俞晓明 |
| 地址： | 235000 *** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明属于分子生物技术领域，特别涉及一种植物基因启动子BSP片段的高效扩增方法，包括以下步骤：根据基因启动子的GC岛和高GC含量区域设计并人工合成相应的引物对数；选择最外侧的两端引物组合对基因启动子进行第一轮PCR扩增，高保真酶扩增33个循环，得第一轮PCR产物；第一轮PCR产物用水稀释10倍体积作为模板，选择靠内侧的两端引物组合进行第二轮PCR扩增，高保真酶扩增35个循环，得扩增产物。本发明提高了植物基因启动子BSP片段的扩增效率，为重亚硫酸盐测序法分析植物基因启动子甲基化修饰提高保障。 | ||
| 搜索关键词： | 基因启动子 扩增 高保真酶 两端引物 种植物 植物基因启动子 分子生物技术 甲基化修饰 分析植物 扩增产物 扩增效率 区域设计 亚硫酸盐 测序法 稀释 引物 | ||
【主权项】：
1.一种植物基因启动子BSP片段的高效扩增方法，其特征在于，包括以下步骤：S1，根据基因启动子的GC岛和高GC含量区域设计并人工合成相应的引物对数；S2，选择基因启动子最外侧的两端引物组合对基因启动子进行第一轮PCR扩增，高保真酶扩增33个循环，得第一轮PCR产物；S3，第一轮PCR产物用水稀释10倍体积作为模板，选择基因启动子靠内侧的两端引物组合进行第二轮PCR扩增，高保真酶扩增35个循环，得扩增产物。
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