[发明专利]一种马氏珍珠贝种苗优化孵化培育方法

摘要

本发明公开的是一种马氏珍珠贝种苗优化孵化培育方法，采取了下述技术措施：采集亲贝；授精前准备；诱导催产；授精；孵化；担轮幼虫收集和暂养；幼虫培育；病虫害防治；附苗；收苗。本发明采集野生原种为亲贝，通过调整培育液的海水PH值及盐度，营造了一个适合马氏珍珠贝繁殖的良好环境，在授精时采用了科学的卵子和精子比例，及时地吸除掉不授精的卵细胞和多余的精细胞及余存的组织细胞，有效的改善了珍珠贝的孵化水质，缩短珍珠贝的洗卵时间，提高了受精卵孵化密度，从而使孵化率提高。本发明孵化培育的马氏珍珠贝种苗健康强壮，品种优良，养殖成活率高，本发明方法容易实施，经济效益高。

主权项

1.一种马氏珍珠贝种苗优化孵化培育方法，其特征在于所述方法包括下述具体技术步骤：（1）采集亲贝：于当年春季三月至五月或秋季八月至十月，采集北部湾海域野生马氏贝母贝原种3 年龄至5年龄,贝壳完整,壳高7cm 以上,放射线明显，腹缘鳞片突出,无病虫害感染,贝壳内壁珍珠层晶莹光润,色泽银白或彩虹色,性腺丰满的马氏珠母贝作为亲贝进行人工授精；其中成熟的雌贝性腺外观呈鲜黄或淡黄色,性腺丰满,表面光滑，挑取少许成熟卵子于载玻片上, 滴上海水即散开，显微镜下成熟卵子,卵径为50μm‑60μm，卵核大而明显,卵黄粒丰富成熟；雄性性腺外观呈乳白色,性腺表面粗糙,呈颗粒状，轻压生殖孔附近有生殖细胞流出,精液呈乳状，成熟精子在30mg/L‑50 mg / L的氨海水中显微镜下观察非常活泼；（2）授精前准备：在人工授精前准备好经过沙滤过的干净海水置于玻璃培育缸中，加入氨水调整海水的酸碱度使海水略为弱碱性，至PH8.3‑8.5，海水比重控制在1.018‑1.021，水温控制在28‑30℃，得到氨海水备用；（3）诱导催产：取亲贝洗涮干净后,用浓度是5毫克/升的高锰酸钾溶液浸泡5‑10分钟,用过滤海水冲洗干净,阴干2‑3小时后,用流速20厘米/秒的常温海水刺激1‑2小时，再将水温升高3℃‑4℃,保持30分钟,移入常温海水待产；或取亲贝清洗、阴干，将亲贝置于温度为 29℃~30℃、浓度为 400毫克/升‑600毫克/升的氨海水中浸泡20‑30分钟后,移入常温海水待产；（4）授精：采取自然授精或人工授精，其中：自然受精：经诱导催产的雌雄亲贝以8:1‑10:1的比例放入盛有新鲜过滤海水的受精箱内进行受精,或将雌雄亲贝分置于不同的受精箱中排放卵、精，将收集的卵、精液混合，用玻璃棒轻轻搅拌均匀，混合液屮卵子浓度为100个/毫升‑30个/毫升，精、卵排放收集时间控制在 1小时内，受精箱的材质为玻璃钢或塑料,箱底面积 1平方米‑3平方米；人工授精：将淸洁干净的容器、解剖刀、胶头滴管、长吸管及筛绢网用5毫克/升的高锰酸钾溶液浸泡5‑10分钟进行消毒处理,再用过滤海水冲洗干净后备用；将洗涮干净的亲贝用解剖刀剪断闭壳肌，去掉贝壳，剪去足丝、外套膜及鳃,使生殖腺裸露,用消毒脱脂棉擦去生殖腺上的体液和海水， 手指挤压生殖腺腺体,用吸管吸取亲贝的精子、卵子,分别放入预先装有过滤海水的玻璃容器中，采精容器为2升装量以上的容器,采卵容器为20升装量以上的容器,容器中装入的海水以每个亲贝需20毫升计，取精时间≤30分钟、取卵时间≤25分钟， 精、卵细胞液分别给150微米筛编网袋过滤冲洗后,将卵液先倒入5升的受精缸中,受精缸预先装1/2体积、浓度为30毫克/升‑50毫克/升过滤氨海水,玻棒轻搅拌,静置5分钟‑l0分钟,卵子胚泡消失后,倒入精液,轻搅充分混合，受精要求雌雄比例4:1‑6:1;水温22‑25℃:盐度23‑32，受精缸卵子浓度为100个/毫升‑300个/毫升受精时间30分钟；（5）孵化： 首先换水洗卵，受精后30分钟底部形成一层白色沉淀层,即可以开始换水洗卵， 先用虹吸法吸除受精缸3/4/上层未下沉的多余精液和劣质卵子,迅速加满过滤海水, 静置，第二次换水时用孔径40微米筛绢包住虹吸管口吸除，时间及频次是每隔30分钟至50分钟洗涤1次，洗涤2次‑3次 ；（6）担轮幼虫收集和暂养： 受精5小时后,幼虫成白色条状，即可用虹吸法用孔径为50微米筛绢网袋收集受精缸中上浮的担轮幼虫，冲洗，移入500升大塑料桶孵化缸孵化暂养，每收集一次，重新加满过滤海水, 静置，再收集，重复2次‑3次，孵化暂养要求：营养水温26℃‑29℃；盐度23‑32；暂养密度50个/毫升‑100个/毫升；暂养时间为12小时；持续微充气，气量以稍微鼓起气泡为准;（7）幼虫培育： 当幼虫发育至直线铰合幼虫期即D型虫期，即能分苗下池，用吸法将幼虫装入数有1/3过滤海水的培育池中，放养密度为2‑4个/毫升，育苗水温为25℃‑30℃,盐度23‑32，育苗池要求:半埋式,地上高度0.7米，深度1.6米‑1.8米，池内水位能保持1.4米‑1.6米，池底倾斜度为2%‑3% ，幼虫下池后3天内,每天添加1/3的新鲜过滤海水,第3天加满至最高位,第4天开始换水， D型幼虫期换水量 1/3,壳顶中后期换水1/2,变态附着阶段换水3/4 以上,直至100%换水，全部附着后用沉淀海水换水，换水时依发育期分别用孔径为40微米、58微米、120微米的筛绢滤水，换水时温度差不超过2℃；在D形幼虫期开始投喂育苗饵料，育苗饵料有金藻、扁藻及盐藻，饵料要求处于生长繁殖旺盛期，浓度高，无病虫害的新鲜藻，换水后在上午8时和下午5时投放饵料，投饵量随幼体生长发育不同阶段而变化，从D型幼虫第1天至45天的幼苗收苗期，亚心形扁藻的投喂量逐日增加，从300个/毫升至3000‑4000个/毫升，雷州半岛叉鞭金藻的投喂量从200个/毫升至600‑1000个/毫升，在D型幼虫前期或加投放面包酵母，投喂量为0.2毫克/毫升‑0.3毫克/毫升；连续微充气，保持水中溶氧量达5.0毫克/升以上；（8）病虫害防治 ：为防止致病菌繁殖,幼虫变态前投放抗生素复方新诺明使浓度达以1毫克/升‑3毫克/升、壳顶初期变态到壳顶中期投放硫酸链霉素使浓度达到1毫克/升，壳顶中期变态到壳顶后期及壳顶后期变态到附着投放土霉素，使浓度达到1毫克/升‑2毫克/升；（9）附苗：附苗器材质采用胶丝网布或聚乙烯塑料薄板, 规格每片长宽为 18厘米×20厘米,或 18厘米×22厘米,或 20厘米×20厘米,每串吊片 10 片‑14 片,片与片间隔 10厘米‑12厘米；附苗器投放前需经反复擦洗,清洁干净后,再用 0.5%的盐酸浸泡 2天 进行消毒,用经过滤的海水冲洗干净备用，新启用的附苗器还需先清水浸泡 10天,再如前述方法进行擦洗,消毒后备用；按每立方米水体附苗器投放量为 100 片‑150 片,2天‑4天内投放完毕，当眼点幼虫有10%时,育苗池底部铺设胶丝网布;眼点幼虫 20%时, 按每立方米水体附苗器投放量为 20 片‑40 片；当眼点幼虫达 40%,按每立方米水体附苗器投放量为 100 片‑120 片，直至最后投完附苗器，让幼虫附着附苗器生长；（10）收苗：将附苗器从育苗池取出放入装有清洁海水的大塑料盆，用手轻抹附着片上泡沫、杂质，将附苗器浸入浓度为 200毫克/升‑250毫克/升的氨海水中 10分钟， 使贝苗自行从附苗器脱落、 过滤、 过滤海水冲洗后即能投入海水养殖池中养殖。